如何緩解賽默飛色譜柱頻繁損壞的問題
賽默飛色譜柱具有數(shù)字通訊功能,軟件與儀器的聯(lián)控功能,直接鼠標(biāo)點(diǎn)擊,就可以完成各種檢測。檢測器傳輸采用三級齒輪減速結(jié)構(gòu),儀器抗震性能*,防止運(yùn)輸及使用過程震動;采用高亮度OLED顯示屏,*的美觀可視效果,超高的質(zhì)量穩(wěn)定性。內(nèi)置氘燈和氘燈,內(nèi)置器件無需更換即可實(shí)現(xiàn)波長從190-850nm轉(zhuǎn)換;儀器使用原裝氘燈,可手動關(guān)/開,更換氘燈時,不必調(diào)整光軸,維護(hù)簡便,氘燈使用壽命長。光路系統(tǒng)采用優(yōu)先的凹面光柵器件、結(jié)合精密定位結(jié)構(gòu)和*的散熱技術(shù),使波長精度高,偏移小和穩(wěn)定時間短,的光學(xué)系統(tǒng)和數(shù)字過濾極大的提高了儀器的靈敏度和結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性并保證了儀器的穩(wěn)定可靠。人性化、便攜化的軟件界面,人機(jī)工程的操作平臺與按鍵,操作便捷、快速;樣品和參比能量顯示便于故障的判斷和排查;儀器內(nèi)部安全報警與自動故障排查功能,維護(hù)方面快捷。具有波長自動校正功能,自動調(diào)零,多量程輸出選擇可滿足各濃度分析需求。
在賽默飛色譜柱的使用中,我們會發(fā)現(xiàn)很多實(shí)驗(yàn)室會面臨色譜柱頻繁損壞的問題。需要來了解一下色譜柱的損壞來源于哪些方面:
泵頭密封圈的磨損;進(jìn)樣閥轉(zhuǎn)子密封圈的磨損;析出的緩沖鹽;樣品中的復(fù)雜易吸附基質(zhì)等等;其實(shí),在工作過程中大多數(shù)的顆粒物堵塞導(dǎo)致的色譜柱背壓升高問題是體現(xiàn)在柱頭堵塞。而樣品的易吸附機(jī)制也可能會和柱前端的硅膠表面游離的硅醇基發(fā)生作用導(dǎo)致色譜柱背壓升高。但是這種情況在較低的PH系統(tǒng)中會有所改善,因?yàn)檩^低的PH系統(tǒng)會降低硅膠表面的硅醇基發(fā)生解離。
預(yù)防措施:
1、在液相系統(tǒng)中加入在線過濾器
在線過濾器的內(nèi)部顆粒空隙一般是0.5微米,對于UHPLC會選擇0.2微米空隙的在線過濾器。這個空隙尺寸和柱頭的過濾篩板尺寸接近或者略小。所以,在線過濾器能夠有效的阻隔來自樣品、泵頭密封墊、自動進(jìn)樣器的轉(zhuǎn)子密封墊的顆粒物,以防止柱頭過濾篩板的堵塞。注意:但是對于非常低死體積的液相系統(tǒng),在線過濾器的加入可能會導(dǎo)致系統(tǒng)死體積增大峰展寬變嚴(yán)重的問題。而對于大多數(shù)的液相系統(tǒng)而言,色譜圖不會有太大變化。
2、在柱子前端使用保護(hù)柱
保護(hù)柱有很多種,通用型、一體式、卡套式,但是它其實(shí)是一個和分析柱固定相相同的10-20mm的小柱子。因?yàn)樗哂泻头治鲋嗤膬?nèi)部填料,所以保護(hù)柱不僅可以阻隔顆粒物,還可以阻隔易吸附的樣品基質(zhì)組分。注意:由于保護(hù)柱中可能有大量的強(qiáng)保留組分,在用強(qiáng)溶劑清洗系統(tǒng)時請取下保護(hù)柱,以防止這些強(qiáng)保留組分被洗脫進(jìn)分析柱。保護(hù)柱如果出現(xiàn)吸附飽和也可能會對分離效果有影響。
3、對樣品進(jìn)行凈化處理
有一些液相的分析方法沒有明確標(biāo)注樣品的凈化,但我希望大家在做分析時都能夠考慮樣品的凈化,常用的方案是對樣品進(jìn)行過濾。在實(shí)際工作中,賽默飛色譜柱的儲存也會影響柱子的使用壽命。那么對于色譜柱的儲存,也有以下建議:
4、使用時注意事項(xiàng):
.為避免管路中的有機(jī)溶劑和氣泡進(jìn)入色譜柱,先用水沖洗整個色譜系統(tǒng),然后才能接入凝膠柱。
.不要讓有機(jī)溶劑進(jìn)入柱中,否則會使填料脫水,導(dǎo)致柱床損壞,要小流速開啟泵,不要快速加大流速,以防止壓力迅猛升高而導(dǎo)致柱床損壞。15mm的柱子流速不要超過3ml/min。
.每次使用后務(wù)*蒸餾水沖洗干凈將含鹽的流動相置換干凈,若較長時間不用請按保存方法保存。
5、保存方法:
.將凝膠柱用蒸餾水沖凈后充上0.02%-0.05%的疊氮鈉水溶液封存,或三氯丁醇苯基汞代鹽將色譜柱封閉后低溫保存(溫度在5℃左右)在冰箱。
.再次使用時,用蒸餾水將保護(hù)溶液沖洗掉即可使用。
.如果次日還要使用也要從系統(tǒng)中取下,將賽默飛色譜柱封閉后存于4~8度的冰箱中冷藏。
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