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當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>技術(shù)文章>>人絡(luò)絲蛋白(RELN)試劑盒操作步驟
遠(yuǎn)遠(yuǎn)的,我聞到了撲鼻的香氣,一陣爽颯的風(fēng)兒吹過(guò),瞧,那一棵棵婆娑的桂花樹(shù),隨風(fēng)搖曳起來(lái)了。咦?那是什么?好似金色的蝴蝶,好似銀色的彩帶,纏綿的飄呀飄,飄落下來(lái),飄到了地上,桂花雖然沒(méi)有琦君故鄉(xiāng)那么多,然而我卻真的感覺(jué)就像琦君所說(shuō)的,成了“金沙鋪地的西方極樂(lè)世界。”接下來(lái)介紹
操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50μl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測(cè)樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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