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林業(yè)菌種標(biāo)本的處理方法

時(shí)間:2017-11-15閱讀:125
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林業(yè)菌種標(biāo)本的處理方法:
(1)血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
(3)尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心,胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(5)組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量,加入一定量的PBS,PH7.4,用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?,?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。
操作步驟:
1. 加規(guī)范品:在酶標(biāo)包被板上設(shè)規(guī)范品孔,順次參加不一樣濃度的規(guī)范品50ul(主張每個(gè)濃度做2個(gè)平行孔)
2. 加樣:別離設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其他各步操作一樣)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品40μl,然后再加樣品親和素10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,悄悄晃動(dòng)混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗刷液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5. 洗刷:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗刷液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:除空白孔外每孔參加酶標(biāo)試劑50μl。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗刷:操作同5。
9. 顯色:每孔先參加顯色劑A50μl,再參加顯色劑B50μl,悄悄震動(dòng)混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 停止:每孔加停止液50μl,停止反響(此刻藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序丈量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加停止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
林業(yè)菌種Human E3/ubiquitin-protein ligase,E3/UBPL ELISA試劑盒    人泛素連接酶(E3/UBPL)ELISA試劑盒     規(guī)格:    96T/48T
Human E-Cadherin,E-Cad ELISA試劑盒     人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒    規(guī)格:    96T/48T
Human echinococcus antibody IgG ELISA試劑盒    人包蟲抗體IgG ELISA試劑盒    規(guī)格:    96T/48T
human EchoVirus IgM,ECHO IgM ELISA試劑盒    人艾柯病毒IgM(ECHO IgM)ELISA試劑盒    規(guī)格:    96T/48T
Human Elastase ELISA試劑盒    人彈性蛋白酶(Elastase)ELISA試劑盒     規(guī)格:    96T/48T
Human Elastase ELISA試劑盒    人彈性蛋白酶(Elastase)ELISA試劑盒     規(guī)格:    96T/48T
Human Elastin,ELN ELISA試劑盒    人彈性蛋白(ELN)ELISA試劑盒    規(guī)格:    96T/48T
Human electron-transfer-flavoprotein beta polypeptide,ETFB ELISA試劑盒    人電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽(ETFB)ELISA試劑盒    規(guī)格:    96T/48T
Human elongin A,EloA ELISA試劑盒    人延伸蛋白A(EloA)ELISA試劑盒    規(guī)格:    96T/48T
Human Endocrine gland vascular endothelial growth factor,EG-VEGF ELISA試劑盒     人內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒    規(guī)格:    96T/48T
Human Endometrium Antibody,EMAb ELISA試劑盒    人抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒    規(guī)格:    96T/48T
Human endomorphin-2,EM-2 ELISA試劑盒    人內(nèi)*肽-2(EM-2)ELISA試劑盒    規(guī)格:    96T/48T
Human Endostatin,ES ELISA試劑盒     人內(nèi)皮抑素(ES)ELISA試劑盒    規(guī)格:    96T/48T
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