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生物菌種實(shí)驗(yàn)條件簡(jiǎn)介

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生物菌種實(shí)驗(yàn)條件簡(jiǎn)介
在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的*適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值而蛋白量*少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
生物菌種人巢蛋白1(NID1)ELISA Kit    英文名:    Human Nidogen 1,NID1 ELISA Kit
人超敏熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA Kit    英文名:    Human Ultra Sensitive Heat Shock Protein 70,HSP-70 ELISA Kit
人超敏熱休克蛋白60(HSP-60)ELISA Kit    英文名:    Human Ultra Sensitive Heat Shock Protein 60,HSP-60 ELISA Kit
人超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA Kit    英文名:    Human high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA Kit
人超磷酸化微管相關(guān)蛋白tau(hyper phosphorylated MAPT)ELISA Kit    英文名:    Human hyper phosphorylated MAPT ELISA kit
人腸道病毒71型(EV71)抗體(IgM)ELISA Kit    英文名:    Human enterovirus 71 virus(EV71)antibody(gM)ELISA kit
人層粘連蛋白亞基γ-2(LAMC2)ELISA Kit    英文名:    Human LAMC2 ELISA Kit
人層粘連蛋白β1(LN-β1)ELISA Kit    英文名:    Human Laminin β1,LN-β1 ELISA Kit
人層粘連蛋白-5(LN-5)ELISA Kit    英文名:    Human Laminin-5,LN-5 ELISA Kit
人布盧姆綜合征蛋白(BLM)ELISA Kit    英文名:    Human BLM ELISA Kit
人補(bǔ)體因子I(CFI)ELISA Kit    英文名:    Human CFI ELISA Kit
人補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白1(CFHR1)ELISA Kit    英文名:    Human CFHR1 ELISA Kit
人補(bǔ)體因子H(CFH)ELISA Kit    英文名:    Human CFH ELISA Kit
人補(bǔ)體因子B前體(pre-CFB)ELISA Kit    英文名:    Human complement factor B precursor,pre-CFB ELISA Kit
人補(bǔ)體片段4d(C4d)ELISA Kit    英文名:    Human Complement Fragment 4d,C4d ELISA Kit
人補(bǔ)體片段3d(C3d)ELISA Kit    英文名:    Human Complement Fragment 3d,C3d ELISA Kit
人補(bǔ)體片段3b受體(C3bR)ELISA Kit    英文名:    Human C3bR ELISA Kit
人補(bǔ)體蛋白9(C9)ELISA Kit    英文名:    Human C9 ELISA Kit
人補(bǔ)體蛋白5(C5)ELISA Kit    英文名:    Human Complement 5,C5 ELISA Kit
人補(bǔ)體C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白1(C1QTNF1/CTRP1)ELISA Kit    英文名:    Human C1QTNF1 ELISA Kit
人補(bǔ)體1抑制物抗體-IgM(C1INH-IgM)ELISA Kit    英文名:    Human Complement 1 inhibitor autoantibody-IgM,C1INH-IgM ELISA Kit
人補(bǔ)體1抑制物抗體-IgG(C1INH-IgG)ELISA Kit    英文名:    Human Complement 1 inhibitor autoantibody-IgG,C1INH-IgG ELISA Kit
人玻連蛋白(VTN)ELISA Kit    英文名:    Human vitronectin ELISA Kit
人并殖吸蟲抗體(IgM)ELISA Kit    英文名:    Human Anti-Paragonimus antibody IgM ELISA kit
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