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99次海洋微生物菌種實驗前準(zhǔn)備要點
1、準(zhǔn)備各種實驗儀器及材料(如:微量移液器、吸頭、醫(yī)用蒸餾水等)。
2、使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。
3、濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1:4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液。
4、濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1:19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液。
5、用應(yīng)用樣品稀釋液來稀釋樣品,按照1:100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,充分混勻待用。
實驗流程的必要步驟
1.樣品的濃度等指標(biāo)是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出來的,所以首先要把做標(biāo)準(zhǔn)曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事,否則后面的實驗結(jié)果無從談起。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品的標(biāo)準(zhǔn)濃度范圍要有一個比較大的跨度,并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度,即樣品的濃度要在標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度范圍之內(nèi),包括上限和下限。而對于呈s型的標(biāo)準(zhǔn)曲線,盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度zui陡段,即曲線幾乎成直線的范圍內(nèi)。
3.采用倍比稀釋法配制標(biāo)準(zhǔn)曲線中的標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度,這樣就能夠保證標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度不會出現(xiàn)較大的偏離。
4.檢測標(biāo)準(zhǔn)樣品時,應(yīng)按濃度遞增順序進(jìn)行,以減少高濃度對低濃度的影響,提高準(zhǔn)確性。
5.標(biāo)準(zhǔn)曲線的樣品數(shù)一般為7個點,但至少要保證有5個點。
6.做出的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)因?qū)嶒炓蟛煌兴儎?,但一般來說,相關(guān)系數(shù)r至少要大于0.98,對于有些實驗,至少要0.99甚至是0.999.
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