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Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A375-Cas9-575操作步驟

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所  在  地上海市

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更新時(shí)間:2017-06-28 09:29:20瀏覽次數(shù):169次

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產(chǎn)地 進(jìn)口 加工定制
適用領(lǐng)域 科研
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A375-Cas9-575操作步驟現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,同時(shí)我司為您提供價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明,歡迎前來(lái)選購(gòu)!

細(xì)胞名稱(chēng)  Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A375-Cas9-575操作步驟
形態(tài)特性 上皮樣

生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)

特征特性 該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使A375細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。

培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS1mM丙酮酸鈉+4mML-Glutamine;400ug/ml G418

傳代方法 1:3~1:8傳代;2~3天換液1次。

傳代情況 C3

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-

STR Amelogeninx,x;CSF1PO11,12;D12S39118,21;D13S31711,14D16S5399,9;D18S5112,17D19S43313,14.2;D21S1129,30;D2S133816,24;D3S135815,17;D5S81812,12D6S104311,14;D7S8209,9;D8S117911,14;FGA23,23;Penta E10,12TH018,8;TPOX8,10;vWA16,17

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類(lèi)

產(chǎn)品名稱(chēng)

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A375-Cas9-575操作步驟

生長(zhǎng)特性

貼壁生長(zhǎng)

發(fā)貨地

上海

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A375-Cas9-575操作步驟的運(yùn)輸和保存
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A375-Cas9-575操作步驟復(fù)蘇操作要點(diǎn): 
1
)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 
2
)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。 
3
)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 
4
800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。 
5
)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 
6
)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

TLR3 Others Mouse 小鼠 TLR3 / CD283 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人前列腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PC-3M-2B4

FO細(xì)胞,骨髓瘤細(xì)胞 人胚肝二倍體細(xì)胞,CCC-HEL-1細(xì)胞 CL-0208SH-SY5Y(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

二氫*還原酶缺陷型中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CHO/dhFr-

LAMP3 Others Human CD208 / LA
SPHK1 Others Human SPHK1 / Sphingosine Kinase 1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CM-H023人甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A 人肺癌細(xì)胞,NCI-H838[H838]細(xì)胞 BGC-823(胃腺癌細(xì)胞(低分化))

人橫紋肌肉瘤細(xì)胞;A-204

IL3RA Others Human IL3RA / CD123 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
CM-H023人甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

SPHK1 Others Human SPHK1 / Sphingosine Kinase 1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A 人肺癌細(xì)胞,NCI-H838[H838]細(xì)胞 BGC-823(胃腺癌細(xì)胞(低分化))

人橫紋肌肉瘤細(xì)胞;A-204

IL3RA Others Human IL3RA / CD123 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
BCYEAgarBase  進(jìn)口分裝  (>98%,BR)  Lead (II) thiocyanate  號(hào):  592-87-0  質(zhì)量規(guī)格:  >98%,BR

LBAgar  進(jìn)口分裝  重水,氧化氘(0.55ml*10)  Deuterium Oxide  號(hào):  7789-20-0  質(zhì)量規(guī)格:  D,99.9%

XyloseLysineDesoxycholateMedium  進(jìn)口分裝  氘代(10 g )  Pyridine-D5  號(hào):  7291-22-7
小鼠血管緊張素elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  鷹嘴豆芽素A(標(biāo)準(zhǔn)品)  Biochanin A  號(hào):  491-80-5  質(zhì)量規(guī)格:  HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠血管活性腸肽elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  鷹嘴豆芽素A  Biochanin A  號(hào):  491-80-5  質(zhì)量規(guī)格:  >98%,BR

小鼠性激素結(jié)合球蛋白elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  柚皮苷,川陳皮素  Naringin  號(hào):  10236-47-2  質(zhì)量規(guī)格:  HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠新生甲狀腺素elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  羽扇豆醇(標(biāo)準(zhǔn)品)  Lupeol  號(hào):  545-47-1  質(zhì)量規(guī)格:  HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A375-Cas9-575操作步驟可溶性淀粉合成酶(SSS)測(cè)試盒  進(jìn)口分裝     英文名稱(chēng):  1,4- butyl ester  號(hào):    分子式:  86.09  分子量:   C4H6O2

β-木糖苷酶測(cè)試盒  進(jìn)口分裝   二十五酸  英文名稱(chēng):  Twenty-five acid  號(hào):    分子式:  382.67  分子量:   CH3(CH2)23COOH

土壤β-葡萄糖苷酶(β-GC)測(cè)試盒  進(jìn)口分裝   甲基叔丁基醚  英文名稱(chēng):  Methyl tert butyl   號(hào):  1634-04-4  分子式:  88.15  分子量:   C5H12O

增殖誘導(dǎo)配體  進(jìn)口分裝   化聚丙烯  英文名稱(chēng):  Chlorinated polypropylene  號(hào):  68442-33-1  分子式:    分子量:

公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A375-Cas9-575操作步驟的報(bào)價(jià),咨詢,稱(chēng)技術(shù)服務(wù),咨詢選購(gòu)

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