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Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT116-Cas9-566實驗方法

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更新時間:2017-06-28 09:31:51瀏覽次數(shù):126次

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適用領(lǐng)域 科研
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT116-Cas9-566實驗方法現(xiàn)貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,細(xì)胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說明書。

細(xì)胞名稱   Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT116-Cas9-566實驗方法
形態(tài)特性 上皮樣;多角

生長特性 貼壁生長

特征特性 該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使HCT116細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Puromycin,經(jīng)2ug/ml嘌呤霉素篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。

培養(yǎng)條件 IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 10%FBS;2ug/ml Puromycin

傳代方法 1:3傳代;3~41次。

傳代情況 C3

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測 培養(yǎng)法(-

STR Amelogeninx,x;CSF1PO7,10D12S39117,21;D13S31710,12;D16S53911,13;D18S5117,17;D19S43312,13D21S1129,30D2S133816,16;D3S135812,19;D5S81810,11;D6S104313,13;D7S82011,12;D8S117912,14;FGA18,23;Penta E13,14;TH018,8;TPOX8,8;vWA17,22;

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A

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產(chǎn)品名稱

生長特性

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Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT116-Cas9-566實驗方法

貼壁生長

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Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT116-Cas9-566實驗方法細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時, 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時, 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生*的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活。
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT116-Cas9-566實驗方法操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
人神經(jīng)束膜細(xì)胞cDNAHPC cDNA

TIGIT Others Mouse 小鼠 TIGIT / VSTM3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

ZA6細(xì)胞,轉(zhuǎn)S9基因倉鼠卵巢細(xì)胞 WI-38(人二倍體胚肺細(xì)胞) 中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1

EFNA2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

BC-009(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠腎足細(xì)胞;Mouse podocyte
DDR1 Others Rat 大鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CM-H033人腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

人腦血管平滑肌細(xì)胞HBVSMC

HEL細(xì)胞,人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞 小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化),M-1細(xì)胞 成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基FM-acf

MFC-GFP(小鼠前胃癌細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記)) 5×106cells/瓶×2

B16(小鼠黑色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R107大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0920
CM-H033人腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

DDR1 Others Rat 大鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人腦血管平滑肌細(xì)胞HBVSMC

HEL細(xì)胞,人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞 小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化),M-1細(xì)胞 成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基FM-acf

MFC-GFP(小鼠前胃癌細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記)) 5×106cells/瓶×2

B16(小鼠黑色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R107大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0920
100mlGN增菌液均質(zhì)袋10/包用于志賀氏菌前增菌培養(yǎng)  進(jìn)口分裝  乙酸異戊酯(standard for GC,99.5%(GC))   Isoamyl acetate  號:  123-92-2  質(zhì)量規(guī)格:  standard for GC,99.5%(GC)

PH7.0NaCl蛋白胨緩沖液500ml/瓶用于制備藥品樣品的稀釋液或沖洗液  進(jìn)口分裝  分散藍(lán) 35(標(biāo)準(zhǔn)品)  Disperse Blue 35  號:  12222-75-2  質(zhì)量規(guī)格:  分析標(biāo)準(zhǔn)品

Bis
小鼠透明質(zhì)酸elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  *,維生素B5  D-Calcium Panthotenate   號:  137-08-6  質(zhì)量規(guī)格:  HPLC法含量測定用

小鼠脫氫表雄elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  *(標(biāo)準(zhǔn)品)  Terazosin HCl  號:  70024-40-7  質(zhì)量規(guī)格:  含量測定

小鼠戊糖素elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  化鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)  Sodium chloride  號:  7647-14-5  質(zhì)量規(guī)格:  含量測定

小鼠細(xì)胞間粘附分子elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  力農(nóng)(標(biāo)準(zhǔn)品)  Amrinone  號:  60719-84-8  質(zhì)量規(guī)格:  UV法含量測定
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT116-Cas9-566實驗方法大鼠趨化因子Fractalkine  進(jìn)口分裝  Eicosyl ferulate  Eicosyl ferulate  133882-79-8  C30H50O4  98%

大鼠血紅素氧化酶  進(jìn)口分裝  Isoelemicin  Isoelemicin  5273-85-8  C12H16O3  98%

大鼠白細(xì)胞間介素 27  進(jìn)口分裝  Neochlorogenic acid  Neochlorogenic acid  906-33-2  C16H18O9  98%

大鼠尿微量白蛋白  進(jìn)口分裝  trans-2,3,4-Trimethoxycinnamic acid  trans-2,3,4-Trimethoxycinnamic acid  33130-03-9  C12H14O5  98%

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