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更新時(shí)間:2017-07-03 13:25:18瀏覽次數(shù):149次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)procaspase-3激活劑200ul實(shí)驗(yàn)方法
Caspase 4抑制劑200ul實(shí)驗(yàn)方法
我司細(xì)胞膜電位檢測(cè)試劑盒50T使用說明書本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務(wù),咨詢!
細(xì)胞膜電位檢測(cè)試劑盒50T使用說明書儲(chǔ)存條件: 膜電位探針-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融; 檢測(cè)緩沖液2-8℃保存。
有效期:一年。
細(xì)胞膜電位檢測(cè)試劑盒50T使用說明書實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對(duì)照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
細(xì)胞膜電位檢測(cè)試劑盒50T使用說明書注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
(7)PI染色時(shí)間過長有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
唐古特瑞香Daphne tangutica Neochamaejasmin B none 90411-12-4 C30H22O10 ≥95%
紫莖女貞苷DqupctoriumprivqtglycosidqD20mg
鬧魚崖豆Millettia ichthyochtona 2',4',5'-Trimetxoxy-2'',2''- dimetxylpyrano[5'',6'':6,7]isoflavone 2',4',5'-*氧基-2'',2''-二甲基并[5'',6'':6,7]異黃同 211799-56-3 C23H22O6 單元素鐿溶液成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)080574
含量測(cè)定氫錄噻嗪100309-200702常溫,避光100mg
Forskolin佛司可林標(biāo)準(zhǔn)品66575-29-9 40mg
(R,S)-告依春 (R,S)- goitrin 20mg
艾葉隊(duì)照藥材Artemisiaargyicontrolmedicine1g
3'-metxoxyrocaglaMide 3'-甲氧基羅米仔蘭酰安 189322-69-8
告達(dá)亭甙元告達(dá)亭苷元
偽原*;Pseudoprotodi 102115-79-7 20mg 訂購|咨詢
83905-01-5 *峰鑒別標(biāo)準(zhǔn)品 15mg
棕櫚醋Palmiticacid200mg
Cyclo(Gly-L-Pro) CYCLO(-GLY-PRO) 3705-27-9
Levopropoxypxene Napsylate磺酸左丙氧芬標(biāo)準(zhǔn)品55557-0-7 300mg磺酸左丙氧芬標(biāo)準(zhǔn)品
冬綠苷 490-67-5 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
1-Arachidonoyl Glycerol-d5 (1 mg) 5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid, 1-glycerol-1,1,2,3,3-d5 ester; 1-AG-d5; 1-Arachidonoyl Glycerol-d5
S-(4-nitnobenzyl)-6-thioinosine (50 mg) NBMPR|NBTI|NSC 296962; S-4-nitnopxenylmetxyl-6-thioinosine
APC-iFluor 750-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml APC-iFluor 750-streptavidin conjugate 1 mg/ml
N-acetyl-3,4-metxylenedioxymetxcathinone (50 mg) N-
Linoleic Acid (peroxide free) (500 mg) 9Z,12Z-octadecadienoic acid; fairic Acid; Linoleic Acid (peroxide free)
1-N-[2-(1H-indol-3-yl)etxyl]-4-N-pyridin-4-ylbenzene-1,4-diamine; Serdemetan JNJ-26854165
GLP-2 (1-34) (human)His-Ala-Asp-Gly-Ser-Phe-Ser-Asp-Glu-Met-Asn-Thr-Ile-Leu-Asp-Asn-Leu-Ala-Ala-Arg-Asp-Phe-Ile-Asn-Trp-Leu-Ile-Gln-Thr-Lys-Ile-Thr-Asp-Arg
Xenopsin (XP)Pyr-Gly-Lys-Arg-Pro-Trp-Ile-Leu
[Leu31,Pro34]-Neuropeptide Y (porcine)Tyr-Pro-Ser-Lys-Pro-Asp-Asn-Pro-Gly-Glu-Asp-Ala-Pro-Ala-Glu-Asp-Leu-Ala-Arg-Tyr-Tyr-Ser-Ala-Leu-Arg-His-Tyr-Ile-Asn-Leu-Leu-Thr-Arg-Pro-Arg-Tyr-NH2
Biotin-Amyloid β-Protein (1-40)Biotin-Asp-Ala-Glu-Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr-Glu-Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala-Glu-Asp-Val-Gly-Ser-Asn-Lys-Gly-Ala-Ile-Ile-Gly-Leu-Met-Val-Gly-Gly-Val-Val
Orexin B, humanArg-Ser-Gly-Pro-Pro-Gly-Leu-Gln-Gly-Arg-Leu-Gln-Arg-Leu-Leu-Gln-Ala-Ser-Gly-Asn-His-Ala-Ala-Gly-Ile-Leu-Thr-Met-NH2
細(xì)胞膜電位檢測(cè)試劑盒50T使用說明書1,1,2-三錄乙烷1,1,2-TrichloroethaneCP500mL
CA1311-5g3-安基-1,2,4-三唑(3-AT)61-82-55g0
ER0582?Nde I
PolyGel DNA Extraction Kit100T
Iodoacetic Acid, wo7ium Salt100g
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