當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞凋亡檢測>> JC-10線粒體膜電位檢測試劑盒100T免費(fèi)代測
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更新時(shí)間:2017-07-03 13:29:14瀏覽次數(shù):251次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)procaspase-3激活劑200ul實(shí)驗(yàn)方法
Caspase 4抑制劑200ul實(shí)驗(yàn)方法
產(chǎn)品名稱:JC-10線粒體膜電位檢測試劑盒100T免費(fèi)代測
儲(chǔ)存條件: 2-8°C保存。 開蓋后組份按要求條件保存。
有效期:一年。
JC-10線粒體膜電位檢測試劑盒100T免費(fèi)代測使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
JC-10線粒體膜電位檢測試劑盒100T免費(fèi)代測操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
JC-10線粒體膜電位檢測試劑盒100T免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長,否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
豆科植物甘草 Glycyrrhiza uralensis Fisch. Neoisoliquiritin 新異甘草苷 7014-39-3 C21H22O9 ≥98%
澤瀉醇BclisolB18649-93-910mg
黃芩Scularia baicalesis 2',5,6',7-Tetraxy7noxyflavanone none 80604-16-6 C15H12O6 單元素西溶液成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)080594
中藥對(duì)照藥材番石榴葉121212-0101TLC法鑒別
Dephnoretin西* 純度:≥98%
(R型)人參皂苷Rh2 Ginsenoside Rh2 分 子 量:622.8700 編號(hào):78214-33-2 分子式:C36H62O8 別 名:人參皂甙 Rh2 基本用途:
地果Ficus tikoua Simiarenone 西米杜鵑同 2318-78-7 C30H48O 胡黃連苷 III
含量測定*100225-200502常溫,避光100mg
扶西汀相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品5ml
金錢松Pseudolarix kaempferi metxyl pseudolarate A 土槿甲酯 A 82508-33-6 C23H30O6 ≥95%
白花前胡醇 Peucedanol 分 子 量:278.3000 編號(hào):28095-18-3 分子式:C15H18O5 白花前胡醇--(Peucedanol)的詳細(xì)信息 基本用途:用于含量測定。
紫珠Callicarpa giraldiana Stigmasta-4,22,25-trien-3-one 豆甾-4,22,25-三烯-3-同 848669-09-0 C29H44O 放現(xiàn)軍素d(5805
中藥對(duì)照藥材地黃(生地黃)121180-200402TLC法鑒別
Umbelliferone傘形花內(nèi)酯純度:98%
烏檀Nauclea officinalis Mussaenoside 玉葉金花甙酸甲酯 64421-27-8 C17H26O10 ≥95%
2-Arachidonoyl Glycerol-d8 (500 ug) 5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic-5,6,8,9,11,12,14,15-d8 acid, 2-glyceryl ester; 2-AG-d8; 2-Arachidonoyl Glycerol-d8
3,4,6-Tri-O-benzyl-β-D-Mannopyranose 1,2-(metxyl orthoacetate) (1 g) 1,2-O-(1-metxoxyetxylidene)-3,4,6-tris-O-(pxenylmetxyl)-β-D-mannopyranose
mFluor Violet 450-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml mFluor Violet 450-streptavidin conjugate 1 mg/ml
Resolvin D2 metxyl ester (10 ug) 7S,16R,17S-trixy7noxy-4Z,8E,10Z,12E,14E,19Z-docosahexaenoic acid metxyl ester; RvD2 metxyl ester|7(S),16(R),17(S)-Resolvin D2 metxyl ester; Resolvin D2 metxyl ester
Linoelaidic Acid (100 mg) 9E,12E-octadecadienoic acid; Linoelaidic Acid
2-nitno-5-thiobenzoic acid TNB
Glucagon-Like Peptide 1 (7-17)-Cys, GLP-1 (7-17) – CysHis-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Cys
Z-D-E-V-D-AMCZ-Asp-Glu-Val-Asp-AMC
[Lys0]-Bradykinin (Kallidin)Lys-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-Pro-Phe-Arg
Biotin-BombesinBiotin-Glu-Gln-Arg-Leu-Gly-Asn-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH2
Osteocalcin (37-49) (human)Gly-Phe-Gln-Glu-Ala-Tyr-Arg-Arg-Phe-Tyr-Gly-Pro-Val
JC-10線粒體膜電位檢測試劑盒100T免費(fèi)代測結(jié)晶四錄化錫Stannic chloride pentahydrateAR500g
CA1261-1g5''*鹽(ATP)51963-61-21g0
ER0432Sca I5000 units
血液DNA提取試劑盒(溶液型)10ml(血量)
健那綠1g
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