Annexin V-FITC / 7-AAD 雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒50T免費(fèi)代測(cè)使用注意事項(xiàng)

1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。

產(chǎn)品名稱：Annexin V-FITC / 7-AAD 雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒50T免費(fèi)代測(cè)
儲(chǔ)存條件：2-8℃避光保存。*保存于-20℃避光。

有效期：一年

Annexin V-FITC / 7-AAD 雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒50T免費(fèi)代測(cè)操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō)，也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
Annexin V-FITC / 7-AAD 雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒50T免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
* Andrographis Paniculata Nees Neoandrographolide *新苷 27215-14-1 C26H40O8 ≥98%

紫萁同Osmundaketone20mg

何首烏Polygonum multiflorum 2,3,5,4'-Tetraxy7noxystilbene 2-O-glucoside 2,3,5,4-四輕基二本葡萄糖苷 82373-94-2 C20H22O9 單元素鍺溶液成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)080578

中藥對(duì)照藥材烏梅121208-0101TLC法鑒別

Ursolic acid烏索酸 純度：≥98%
(±)原蘇木素B (+)protosappanin B 20mg

皇連隊(duì)照藥材Coptiscontrolmedicine1g

metxyl rosMarinate 迷迭香酸甲酯 99353-00-1

*醚內(nèi)酯13476-25-0Linderane

雪*;Cedrol 77-53-2 20mg 訂購(gòu)|咨詢
*德糖胺標(biāo)準(zhǔn)品 15mg

棕櫚醋酯Palmiticacidmetxylester25mg

Paeoniflorin 芍藥苷 23180-57-6

異扶烷相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品1885-48-9 0.1ml

丹葉大黃素 500-65-2 HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
Lyso-PAF C-16-d4 （5 mg）     1-O-hexadecyl-（7，7，8，8-d4）-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine； Lyso-Plaet-activating Factor C-16-d4； Lyso-PAF C-16-d4

UNC3230 （5 mg）     5-[（cyclohexylcarbonyl）amino]-2-（pxenylamino）-4-thiazolecarboxamide

PerCP-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml     PerCP-streptavidin conjugate 1 mg/ml

CAY10679 （50 mg）     1，1’-（1，8-dioxo-1，8-octanediyl）bis[glycyl-glycine； N，N’-bis（glycyl-glycine）-hexane-1，6-Dicarboxyamide； CAY10679

Linoleic Acid （peroxide free） （100 mg）     9Z，12Z-octadecadienoic acid； fairic Acid； Linoleic Acid （peroxide free）

2-（Phosphonometxyl）pentane-1，5-dioi     NAALDase Inhibitor， Pmpe
GLP-1 (7-36)-Lys(biotinyl) amide (human, bovine, guinea pig, mouse, rat)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Lys(bio) -NH2

WWamide-3Trp-Lys-Gln-Met-Ser-Val-Trp-NH2

[Leu15]-Gastrin I (human)Pyr-Gly-Pro-Trp-Leu-Glu-Glu-Glu-Glu-Glu-Ala-Tyr-Gly-Trp-Leu-Asp-Phe-NH2

Biotin-a-CGRP (canine, mouse, rat)Biotin-Ser-Cys-Asn-Thr-Ala-Thr-Cys-Val-Thr-His-Arg-Leu-Ala-Gly-Leu-Leu-Ser-Arg-Ser-Gly-Gly-Val-Val-Lys-Asp-Asn-Phe-Val-Pro-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Glu-Ala-Phe-NH2 (Disulfide bridge:Cys2-Cys6)

Opioid receptor antagonistAc-Arg-Phe-Met-Trp-Met-Lys-NH2
Annexin V-FITC / 7-AAD 雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒50T免費(fèi)代測(cè)三錄乙酸Trichloroacetic acidAR500g

CA1341-100g瓊脂糖9012-36-6100g0

ER0601Pae I500 units

質(zhì)粒小量提取試劑盒50T

典代乙酰胺(典乙酰胺)5g