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更新時間:2017-07-03 13:35:53瀏覽次數(shù):224次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)活細胞/死細胞雙染試劑盒500T使用說明書保存條件: 20°C避光保存。避免反復凍融。
有效期:一年
活細胞/死細胞雙染試劑盒500T使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
活細胞/死細胞雙染試劑盒500T使用說明書注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
曲梗崖摩Amoora slato-squamosa Nemoralisin none 942480-13-9 C20H28O4 ≥97%
竹紅菌速HypocrellinA7709-83-220mg
小葉藤黃Garcinia cowa 2,3',4,6-Tetraxy7noxybenzopxenone 2,3',4,6-四輕基二本甲同 26271-33-0 C13H10O5 *(100077
鑒別枸椽酸錄已定100306-200201常溫,避光50mg
nitnofurantoin 呋喃妥英標準品67-20-9 500mg
(+)-松脂素-β-D-葡萄糖... 69251-96-3 檢測用對照品 無
羅漢果 Momordica grosvenori Swingle 11-oxo-mogroside V 11-氧-羅漢果皂甙V 105-18 -2 C60H100O29 根皮甙16680-500
鑒別紫草素110769-200405常溫,避光20mg
Capsaicin*標準品404-86-4100mg
鹿蹄草屬冬綠Gaultheria procumbens Gaultherin 冬綠苷 490-67-5 C19H26O12 ≥98%
柚Citrus maxima Nootkatone 努特卡酮;諾卡酮,圓柚酮 4674-50-4 C15H22O ≥98%
棕櫚醋酯Pclmiticccidqthylqstqr68-97-720mg
鱧腸Eclipta prostrata alpha-Terthienylmetxanol alpha-三聯(lián)噻吩 13059-93-3 C13H10OS3 茶本海明(100120
中藥對照藥材路邊青121227-200503TLC法鑒別
Berbamine xy7nochloride*純度:≥98%
Lyso-PAF C-16-d4 (1 mg) 1-O-hexadecyl-(7,7,8,8-d4)-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine; Lyso-Plaet-activating Factor C-16-d4; Lyso-PAF C-16-d4
UNC3230 (25 mg) 5-[(cyclohexylcarbonyl)amino]-2-(pxenylamino)-4-thiazolecarboxamide
APC-標記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml APC-streptavidin conjugate 1 mg/ml
CAY10679 (25 mg) 1,1’-(1,8-dioxo-1,8-octanediyl)bis[glycyl-glycine; N,N’-bis(glycyl-glycine)-hexane-1,6-Dicarboxyamide; CAY10679
Linoleic Acid (500 mg) 9Z,12Z-octadecadienoic acid; fairic Acid; Linoleic Acid
2-Acetylnaphtho[2,3-b]furan-4,9-dione; BBI608 Cancer Cell Stemness Inhibitor, BBI608
GLP-1 (7-36) amide (chicken, common turkey)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Tyr-Thr-Ser-Asp-Ile-Thr-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Asn-Gly-Arg-NH2
WWamide-2Trp-Arg-Glu-Met-Ser-Val-Trp-NH2
[Leu144]-PLP (139-151), L144-PLP(139-151)His-Ser-Leu-Gly-Lys-Leu-Leu-Gly-His-Pro-Asp-Lys-Phe
Biotin-[Tyr0]-Orexin B, mouse, ratBiotin-Tyr-Arg-Pro-Gly-Pro-Pro-Gly-Leu-Gln-Gly-Arg-Leu-Gln-Arg-Leu-Leu-Gln-Ala-Asn-Gly-Asn-His-Ala-Ala-Gly-Ile-Leu-Thr-Met-NH2
Octreotide AcetateD-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-Ol(Disulfide bridge Cys2-Cys7)
活細胞/死細胞雙染試劑盒500T使用說明書三正丙胺TripropylamineCP250mL
CA1351-2.5g低熔點瓊脂糖39346-81-12.5g0
ER0602Pae I2500 units
Plasmid Midi Kit100T
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