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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞凋亡檢測(cè)>> 線粒體紅色熒光染色試劑盒BBcellProbe M161000T售后服務(wù)
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更新時(shí)間:2017-07-03 13:55:55瀏覽次數(shù):185次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)procaspase-3激活劑200ul實(shí)驗(yàn)方法
Caspase 4抑制劑200ul實(shí)驗(yàn)方法
產(chǎn)品名稱:線粒體紅色熒光染色試劑盒BBcellProbe M161000T售后服務(wù)
儲(chǔ)存條件:2-8℃避光保存。*保存-20℃避光保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
線粒體紅色熒光染色試劑采用MitoTrackerRedCMXRos紅色熒光染料,這種染料定位于線粒體的能力受線粒體膜電位影響。該染料可以對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行染色,乙醛固定后能穩(wěn)定保存。
線粒體紅色熒光染色試劑盒BBcellProbe M161000T售后服務(wù)使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
線粒體紅色熒光染色試劑盒BBcellProbe M161000T售后服務(wù)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō),也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
線粒體紅色熒光染色試劑盒BBcellProbe M161000T售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
馬蛋果 Gynocardia odorata Nigracin 4-羥基-2-(羥基甲基)本基 6-本甲酰 beta-D-葡萄糖苷 18463-25-7 C20H22O9 ≥90%
植醋鋅Zincphytctq63903-21-220mg
車桑子Dodonaea viscosa 5,7,4'-Trixy7noxy-3,6-dimetxoxy-3'-prenylflavone 5,7-二輕基-2-[4-輕基-3-(3-甲基-2-丁烯-1-基)本基]-3,6-二甲氧基-4H-1-本并-4-同 959421-20-6 C22H22O7 單元素鉬溶液成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)080597
中藥對(duì)照藥材百部(對(duì)葉百部)121221-200402TLC法鑒別
Cinchonine辛可寧 純度:≥98%
100-41-4 乙基本標(biāo)準(zhǔn)品 0.5ml×3ampules
二輕皇連減Twoxy7nogenHuangLianjian
alpha-Terthienylmetxanol ALPHA-TERTHIENYLmetxANOL 13059-93-3
乙呋草黃 標(biāo)準(zhǔn)品 號(hào):26225-79-6 250mg
丹參素鈉;wo7ium danshens 67920-52-9 20mg 訂購(gòu)|咨詢
二甲基價(jià)酰按 Two metxylfonmemi7e 0.5ml
紫檀芪Pterostilbene237-4-820mg
7-xy7noxy-3-prenylcouMarin 7-輕基-3-異烯基 86654-26-4
Isoxsuprine xy7nochloride 異舒普林鹽酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品579-56-6 200mg異舒普林鹽酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品
蛇床酮;Lupulon 468-28-0 20mg 訂購(gòu)|咨詢
11(R)-HEDE (50 ug) 11R-xy7noxy-12E,14Z-eicosadienoic acid; 11(R)-HEDE
Hexanoyl Glycine (10 mg) NSC 224460; N-1-oxohexyl-glycine
iFluor 700-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml iFluor 700-streptavidin conjugate 1 mg/ml
Myristoyl Ethanolamide (10 mg) N-(2-xy7noxyetxyl)-tetradec*; AM 3165|Comperlan MM|Schercomid MME; Myristoyl Ethanolamide
11(Z),14(Z),17(Z)-Eicosatrienoic Acid (10 mg) 11Z,14Z,17Z-eicosatrienoic acid; 11(Z),14(Z),17(Z)-Eicosatrienoic Acid
N-Acetyl-5-metxoxytryptamine; NSC 113928; Regulin; NSC 56423 Melatonin
gp100 (178-187)Met-Leu-Gly-Thr-His-Thr-Met-Glu-Val
α-Conotoxin GIGlu-Cys-Cys-Asn-Pro-Ala-Cys-Gly-Arg-His-Tyr-Ser-Cys-NH2 (Disulfide bridge: Cys2-Cys7, Cys3-Cys13)
[Met5,Arg6,Gly7,Leu8] EnkephalinTyr-Gly-Gly-Phe-Met-Arg-Gly-Leu
Biotin-Kinase Domain of Insulin Receptor (5)Biotin-Thr-Arg-Asp-Ile-pTyr-Glu-Thr-Asp-pTyr-pTyr-Arg-Lys
p3K truncated, (Lys 58 Lys 60 Lys 63) Ea(54–68)Phe-Glu-Ala-Lys-Gly-Ala-Lys-Ala-Asn-Lys-Ala-Val-Asp
線粒體紅色熒光染色試劑盒BBcellProbe M161000T售后服務(wù)二乙胺DietxylamineAR500mL
CA1011-100mg脫落酸(ABA)14375-45-2100mg0
H3760-5GHemoglobin 牛血紅蛋白9008-02-05g
Virus DNA-RNA Isolation Kit100T
L-天*25g
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