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Caspase 10 活性檢測試劑盒20T免費代測

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更新時間:2017-07-03 13:59:59瀏覽次數(shù):219次

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Caspase 10 活性檢測試劑盒20T免費代測儲存條件:裂解緩沖液和檢測液室溫保存;其他-20℃避光保存。

有效期:一年。

產(chǎn)品簡介:

Caspase10活性檢測試劑盒(Caspase10ActivityAssayKit)是采用分光光度法檢測細胞或組織裂解液中Caspase10酶活性或純化的Caspase10酶活性的試劑盒。Caspase家族在介導細胞凋亡的過程中起著非常重要的作用,其中Caspase-10是近年來發(fā)現(xiàn)的一類含有死亡效應結(jié)構(gòu)域(dead-effectordomain,DED)的蛋白酶,在結(jié)構(gòu)上與Caspase家族的另一成員Caspase-8有很高的同源性,通過形成死亡誘導信號復合物(deathinducedsignalingcomplex,DISC),激活自身蛋白酶活性,傳遞凋亡信號。Caspase-10的功能異常與許多疾病的發(fā)生有著密切的關(guān)系。

Caspase-10比色法檢測試劑盒提供了一種簡單方便的方法檢測能識別AEVD序列的 caspases活性。本檢測技術(shù)基于酶切標記了的底物AEVD -對硝基苯胺(pNA)之后對發(fā)光基團pNA進行光譜光量測量。pNA發(fā)射的光譜可以被分光光度計或者微量滴定板讀數(shù)器在400-405 nm出定量檢測。 本試劑盒用酶標儀檢測或容量不超過100μl的分光光度檢測杯檢測,可用于培養(yǎng)細胞或新鮮組織樣本的caspase-10檢測。

Caspase 10 活性檢測試劑盒20T免費代測實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
1)取 1060 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
Caspase 10 活性檢測試劑盒20T免費代測注意事項
1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
顯脈香茶菜Rabdosia nervosa Nodosin 諾多星 10391-09-0 C20H26O6 98.5%

組安醋Histidinq71-00-120mg

望江南Cassia occidentalis 7,3',4'-Trixy7noxyflavone 3',4',7-三輕基黃同 2150-11-0 C15H10O5 醋酸*(100122

中藥對照藥材黑螞蟻121226-200301TLC法鑒別

Stachydrine xy7nochloride鹽酸水蘇堿 純度:≥98%
101666-68-6 *雜質(zhì)D標準品 10mg

鹽醋xy7nochloride20mg

Isosalicifolin 156974-99-1

Mirtazapine *標準品85650-52-8 350mg*標準品

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Cabraleaxy7noxylactone 南美楝輕基* 35833-69-3

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芫花素;Genkwanin 437-64-9 20mg 訂購|咨詢
15-OxoEDE 250 ug     15-oxo-11Z,13E-eicosadienoic acid 15-KEDE; 15-OxoEDE

LEI-106 25 mg    

Annexin V, FITC標記的     Annexin V, FITC Labeled

Lignoceroyl Ethanolamide 50 mg     N-2-xy7noxyetxyl-tetracos*; Lignoceroyl Ethanolamide

5,8,11-Eicosatriynoic Acid 5 mg     5,811-eicosatriynoic acid; 5,8,11-ETI; 5,8,11-Eicosatriynoic Acid

4-     SB 202190
GPC3 (298-306), mouseGlu-Tyr-Ile-Leu-Ser-Leu-Glu-Glu-Leu

α-Helical CRF (9-41)Asp-Leu-Thr-Phe-His-Leu-Leu-Arg-Glu-Met-Leu-Glu-Met-Ala-Lys-Ala-Glu-Gln-Glu-Ala-Glu-Gln-Ala-Ala-Leu-Asn-Arg-Leu-Leu-Leu-Glu-Glu-Ala-NH2

[Nle253]-HSV-1 UL 26 Open Reading Frame (238-257)Gly-Ile-Ala-Gly-His-Thr-Tyr-Leu-Gln-Ala-Ser-Glu-Lys-Phe-Lys-Nle-Trp-Gly-Ala-Glu

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