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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞增殖/毒性檢測(cè)>> WST-1細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒250T使用說(shuō)明書
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更新時(shí)間:2017-07-03 14:10:04瀏覽次數(shù):183次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)血管通透性測(cè)試染色試劑盒20ml免費(fèi)代測(cè)
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細(xì)胞骨架染色試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法
我司WST-1細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒250T使用說(shuō)明書本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購(gòu)模式!我們將竭誠(chéng)為您服務(wù),咨詢!
WST-1細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒250T使用說(shuō)明書儲(chǔ)存條件: 2-8℃避光保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
WST-1是廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測(cè)試劑。WST-1是一種類似于MTT的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan。細(xì)胞增殖越多越快,則顏色越深;細(xì)胞毒性越大,則顏色越淺。WST-1是MTT的一種升級(jí)替代產(chǎn)品,和MTT或其它MTT類似產(chǎn)品如XTT、MTS等相比有明顯的優(yōu)點(diǎn)。首先,MTT被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶解液來(lái)溶解;而WST-1和XTT、MTS產(chǎn)生的formazan都是水溶性的,可以省去后續(xù)的溶解步驟。其次,WST-1產(chǎn)生的formazan比XTT和MTS產(chǎn)生的formazan更易溶解。再次,WST-1比XTT和MTS更加穩(wěn)定,使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加穩(wěn)定。
WST-1細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒250T使用說(shuō)明書實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50~100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬(wàn)細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
WST-1細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒250T使用說(shuō)明書注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過(guò)皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
(7)PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
國(guó)槐Sophora japonica Rhododendrol 杜鵑醇 59092-94-3 C10H14O2 ≥96%
原蘇木速BProtoscppcninB10mg/支
安五脂素 Anwuligan 107534-93-0 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
中藥對(duì)照藥材籬欄網(wǎng)121473-200401TLC法鑒別
Ginkgolic Acids
144750-42-5 錄吡格雷相關(guān)雜質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 20mg
小檗科(Berberidaceae) 三葉裸花草 Achlys triphylla(Smith)DC.地下部分 金腰酚D 14965-20-9 ≥98% 異環(huán)靈酰安(I0060000
枯草隆標(biāo)準(zhǔn)品 毒死蜱氧化物標(biāo)準(zhǔn) 毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)品
metxyl Caprylate 辛酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品111-11-5 300mg
脫水*內(nèi)酯 134418-28-3 HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
黃花香茶菜Isodon sculponeata Sculponeatin N 黃花香茶菜甲素 1169805-98-4 C25H40O4 ≥95%
原人參三醇Rcwginsqngthrclcohol20mg/支
川續(xù)斷皂苷VI;木通皂苷D Asperosaponin Ⅵ 39524-08-8 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
HPLC法含量測(cè)定3-羥基-1-芐基吲唑100702-200401常溫,避光50mg
Clobetasol Propionate丙酸錄倍他索標(biāo)準(zhǔn)品25122-46-7200mg
*shēng huà shì jì容量:5克
(酸水解酪素)
AGAROSELF大片段瓊脂糖(脈沖電泳)(原Agarose Ⅲ)脈沖電泳級(jí)
異炳醇鋁;異炳基氧化鋁;三異炳醇鋁 cluMinuM isopropoxidq;2-Propcnol cluMinuM sclt 22-31-7
D-半乳糖 D-Gclcctosq 1929/3/4
3-嶙酸甘油酸激酶25克
六拂鱗醋三本基碳 TRIPHqNYLCcRBqNIUM HqXcFLUOROPHOSPHcTq 437-17-
2-(4-Bromopxenyl)thiopxene 40133-22-0
2,3,4-三羥基二苯甲酮 2,3,4-Trihydroxybenzophenone,97% 1143-72-2 25G 通用試劑
**兩性霉素B溶液/Penicillin&Streptomycin&Amphotericin B solution,γ-Irradiated 組織培養(yǎng)級(jí),γ-射線滅菌 10毫升 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
WST-1細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒250T使用說(shuō)明書微量可調(diào)移液器P10 支 Gilson原裝
TAPS,wo7iumSALTTAPS Na生物技術(shù)級(jí)白色粉末RTsigma
聚二醇3350 Polyqthylqnq Glycol 3350; 23-68-3
乙基纖維素/纖維素/纖維素乙基醚/EC/Ethyl cellulose CP,黏度180-220 100克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
凡士林/白凡士林/石油脂(I)/Vaselineoil BR 500克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
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