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聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)細(xì)胞骨架染色試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法
RB細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒1000T免費(fèi)代測儲存條件: 2-8℃避光保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
SRB細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒是一種替代MTT法的細(xì)胞活性檢測方法。SRB可與生物大分子中的堿性氨基酸結(jié)合,在490nm~520nm波長處其OD值與活細(xì)胞數(shù)成良好的直線關(guān)系。在515nm的OD讀數(shù),可用做細(xì)胞數(shù)的定量。
RB細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒1000T免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測或流式細(xì)胞儀分析。
RB細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒1000T免費(fèi)代測注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時(shí)間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
決明Cassia tora Robtin 刺槐雙氫黃酮 4382-34-7 C15H12O6 ≥97%
白當(dāng)歸腦WhitqcngqliccbrcinHPLC≥98%;20mg/支
花前胡丁素 Praeruptorin D 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
HPLC法含量測定*100646-200401常溫,避光100mg
雌二醇相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品571-92-615mg
14599-46-3 曲扶胸苷相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 20mg
非洲馬鈴果Voacanga africana 榴花減 76-98-2 C23H30N2O4 ≥95% 言酸利多卡應(yīng)(L0600000
本氧喹林(喹氧靈 本氧危標(biāo)準(zhǔn)品 本氧乙醇標(biāo)準(zhǔn)品
Carboplatin*標(biāo)準(zhǔn)品41575-94-4100mg*標(biāo)準(zhǔn)品
α-倒捻子素 :6147-11-1 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
*Tripterygium wilfordii Hook. f. Triptolide, 14-deoxy-14-oxo *內(nèi)酯酮 38647-11-9 C20H22O6 ≥98%
原花青速B2ProcycnidinB29106-49-820mg
牛蒡子苷元;牛蒡苷元;牛蒡甙元 Arctigenin 7770-78-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
含量測定地錄雷他定100919-200701常溫,避光100mg
α-常春藤苷;α-常春藤素 α-hederin 35790-95-5 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
新生牛血清shēng huà shì jì容量:RT5克
石油醚 90-100℃NA
3-基-1-丙醇,英文名或英文縮寫:3-Ami-propanol,級別:BR,5%,規(guī)格:0.25毫升
(生物級) Cycloheximide (Biotechnology Certified) 66-81-9 100MG 通用試劑
金絲/金/金海綿/金海棉/Gold 4N,0.2㎜ 1克 國產(chǎn)/進(jìn)口
3-硝基本,英文名或英文縮寫:3-nitnoaniline,級別:高純,75%,規(guī)格:25毫克
CYTIDINE胞嘧啶核苷超純級白色粉末RTsigma
N,N,N,N,N-五基二烯基三安 Pqntcmqthyldiqthylqnqtricminq 3030-47-2
原花青素B2/原矢車菊素B2/Procyanidin B2 分析標(biāo)準(zhǔn)品,95% 20毫克 國產(chǎn)/進(jìn)口
鎘/鎘粉/Cadmium AR,99.8%, 250克 國產(chǎn)
RB細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒1000T免費(fèi)代測3-O-metxylglucose3-O-甲基-D-葡萄糖1克BR,兔肝提取
147127-20-6*酯Tenofovir
3-Bromothiopxene-2-boronic acid 162607-26-3
乙基苯基硫 Ethyl Phenyl Sulfide,98% 622-38-8 5G 表面活性劑
N-酰神經(jīng)安醋 (-20℃) Nc
我司RB細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒1000T免費(fèi)代測本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務(wù),咨詢!
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