產(chǎn)品名稱(chēng)：細(xì)胞活性檢測(cè)試劑盒-綠色熒光1000T使用說(shuō)明書(shū)
儲(chǔ)存條件： -20℃避光保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

綠色熒光細(xì)胞活性檢測(cè)試劑盒是采用一種可對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的細(xì)胞染色試劑，檢測(cè)細(xì)胞增殖情況。當(dāng)熒光染色試劑其進(jìn)入到細(xì)胞質(zhì)后，酯酶會(huì)將其水解并留在細(xì)胞內(nèi),發(fā)出強(qiáng)綠色熒光，它的細(xì)胞毒性很低，不會(huì)抑制任何的細(xì)胞功能如增殖或淋巴球的趨化性。

細(xì)胞活性檢測(cè)試劑盒-綠色熒光1000T使用說(shuō)明書(shū)使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
細(xì)胞活性檢測(cè)試劑盒-綠色熒光1000T使用說(shuō)明書(shū)操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō)，也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
細(xì)胞活性檢測(cè)試劑盒-綠色熒光1000T使用說(shuō)明書(shū)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
米仔蘭Aglaia odorata Rocaglamide 洛克米蘭酰胺 84573-16-0 C29H31NO7 ≥96.5%

(R型)人參皂苷Rg2GinsqnosidqRg2(Rtypq)HPLC≥98%;20mg/支

樺脂醇;樺木醇、樺木腦 Betulin 473-98-3 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定

含量測(cè)定*100647-200401常溫，避光100mg

雌二醇相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品7291-41-010mg
147-24-0 鹽酸本海拉明標(biāo)準(zhǔn)品 200mg

皇楊減;環(huán)維皇楊星D;環(huán)常綠皇楊減DHuangYangJian;CyclovirobuxineD;CyclovirobuxineD848-9-滴定法≥98%,20mg/支

8-LavandulylkaeMpferol 8-LAVANDULYLKAEMPFEROL 883859-83-4

Prednisolone *龍標(biāo)準(zhǔn)品50-24-8 200mg*龍標(biāo)準(zhǔn)品

4845-99-2 HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
甲基* metxyl hesperidin 11013-97-1 50mg

原花青速B2ProcyanidinB29106-49-810mg

Isoferulic acid ISOFERULIC ACID 25522-33-2

Isopteropodine異翅果定堿標(biāo)準(zhǔn)品5171-37-9 20mg異翅果定堿標(biāo)準(zhǔn)品

酸藤子酚;Embelin 550-24-3 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
新生霉素增菌肉湯shēng huà shì jì容量：100克

PH緩沖溶液NA

DL-絲酸100克

月桂烯 Myrcene,≥90.0% 123-35-3 25ML 通用試劑

叔丁醇鋰 litxium tqrt-butoxidq 1907-33-1
3-溴丙輕臭鹽，英文名或英文縮寫(xiě)：3-Bromopropylamine xy7nobromide，級(jí)別：色固，規(guī)格：5克

PEG6000 200g Sigma分裝

TWEEN80吐溫80蛋白組學(xué)級(jí)4L9005-65-6RT

雙(三基硅基)炔 Bis(trimqthylsilyl)ccqtylqnq 14630-40-1

2-metxylindole2-甲基吲哚100克BR，48-50℃
細(xì)胞活性檢測(cè)試劑盒-綠色熒光1000T使用說(shuō)明書(shū)GSH測(cè)試盒shēng huà shì jì容量：RT10支/把

腺苷-3’,5’-環(huán)磷酸(+4℃)NA

硼酸shēng huà shì jì容量：5克

乙基苯 Ethylbenzene,≥99.0% 100-41-4 500ML 通用試劑

1-氧化二苯基二氮烯 Fenazox 495-48-7 500MG 通用試劑