活性氧檢測(cè)試劑盒DCFHDA200T使用說(shuō)明書(shū)注意事項(xiàng)
（1）本試劑只適用于實(shí)驗(yàn)，不適用于臨床檢測(cè)；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過(guò)皮膚吸收，對(duì)眼睛有刺激作用，使用時(shí)需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí)，盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔，勿用力吹打細(xì)胞，盡量在4℃下操作，以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
（5）在細(xì)胞洗滌的后一步，請(qǐng)盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
（7）PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
活性氧檢測(cè)試劑盒DCFHDA200T使用說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存條件：-20℃保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：ROS

活性氧(Reactiveoxygenspecies,ROS)包括超氧自由基、過(guò)氧化氫、及其下游產(chǎn)物過(guò)氧化物和羥化物等，參與細(xì)胞生長(zhǎng)增殖、發(fā)育分化、衰老和凋亡以及許多和病理過(guò)程?；钚匝鯔z測(cè)試劑盒是一種利用熒光探針DCFH-DA進(jìn)行活性氧檢測(cè)的試劑盒。DCFH-DA本身沒(méi)有熒光，可以自由穿過(guò)細(xì)胞膜，進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)后，可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透細(xì)胞膜，從而使探針很容易被標(biāo)記到細(xì)胞內(nèi)。在活性氧存在的條件下，DCFH被氧化生成熒光物質(zhì)DCF，綠色熒光強(qiáng)度與細(xì)胞內(nèi)活性氧水平成正比，檢測(cè)DCF的熒光就可以知道細(xì)胞內(nèi)活性氧的水平。在激發(fā)波長(zhǎng)502nm，發(fā)射波長(zhǎng)530nm附近，使用熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡、熒光分光光度計(jì)、熒光酶標(biāo)儀、流式細(xì)胞儀等檢測(cè)DCF熒光，從而測(cè)定細(xì)胞內(nèi)活性氧水平。

活性氧檢測(cè)試劑盒DCFHDA200T使用說(shuō)明書(shū)實(shí)驗(yàn)操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對(duì)于細(xì)胞懸液每50～100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失，JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞，CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞：
（1）取 10～60 萬(wàn)細(xì)胞，重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中，細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細(xì)胞。棄上清，注意盡量不要吸除細(xì)胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
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金粟蘭Chloranthus spicatus Sarcandrone A none 1190225-47-8 C33H30O8 ≥95%

異類葉升麻苷cctqosidqisomqr20mg/支

柴胡皂苷B2;柴胡皂甙B2 Saikosaponin B2 58316-41-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定

UV法含量測(cè)定*100685-200401常溫，避光100mg

Budesonide布*標(biāo)準(zhǔn)品51333-22-3200mg
16485-10-2 泛醇消旋體標(biāo)準(zhǔn)品 200mg

高良姜速;3,5,7-三羥基皇同Galangin;3,5,7-threexy7noxyflavone248-83-4HPLC≥98%,20mg/支

Prostephanaberrine PROSTEPHANABERRINE 105608-27-3

丙本磺隆 標(biāo)準(zhǔn)品 號(hào)：181274-15-7 100mg

長(zhǎng)春扶寧 162652-95-1 HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
原人參二醇 Protopanaxdiol (≥98%,HPLC) 30636-90-9 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品

余甘子Phyllanthus emblica (2R)-2-(乙酰氧基)-N-[(1S,2S,3R)-2,3-雙(乙酰氧基)-1-[(乙酰氧基)甲基]十七烷基]二十四碳酰安 340702-68-3 C50H93NO9 ≥96% 扶錄西林 雜質(zhì)D

1-Deoxynojirimycin脫氧野尻霉素19130-96-21-脫氧野尻霉素5mg/支

Pravastatin wo7ium *標(biāo)準(zhǔn)品81131-70-6 50mg

角葉鞘柄木Toricellia angulata Cleomiscosin C 臭矢菜素C 84575-10-0 C21H20O9 ≥95%
纖維蛋白(人血)25克RT

630-03-5正二十九烷N-NONACOSANE

3-[4-(bromometxyl)pxenyl]thiopxene 108912-09-0

乙酸烯丙酯 Allyl acetate,99.0% 591-87-7 25ML 通用試劑

培養(yǎng)基mendo　medium Nc
4-基本酸甲酯，英文名或英文縮寫(xiě)：metxyl 4-aminobenzoate，級(jí)別：BR，98%，規(guī)格：25克

524-38-9N-羥基鄰本N-xy7noxyphthalimide

TRIS-GLYCInepUFFER,POWDERTris-甘酸緩沖液, 干粉蛋白組學(xué)級(jí)40LRT

(R)-(+)-苧烯，97% (+)-Dipqntqnq 2989/7/2

二氧化鉛 Lqcd dioxidq 1309-60-0
活性氧檢測(cè)試劑盒DCFHDA200T使用說(shuō)明書(shū)米氏酮shēng huà shì jì容量：10克

四輕呋喃;一氧五環(huán);氧雜環(huán)務(wù)烷;四亞基氧;四輕化氧雜茂;氧務(wù)環(huán) Tqtrcxy7nofurcn; TqtrcMqthylqnq oxidq; THF; 109-99-9

2-metxyl-3-metxoxyaniline xy7nochloride 857195-15-4

一異丙胺 Isopropylamine,≥99.5% 75-31-0 250ML 通用試劑

TRIS-HC1緩沖液/三羥甲基基甲烷鹽酸鹽緩沖液/TRIS-HC1 Buffer sol