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更新時間:2017-07-05 10:38:01瀏覽次數(shù):221次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)細菌膜蛋白提取試劑盒100T免費代測注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
細菌膜蛋白提取試劑盒100T免費代測儲存條件:蛋白酶抑制劑-20℃保存; 蛋白提取液2-8℃保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
膜蛋白樣品的制備需要充分考慮到與下游的膠分析及質(zhì)譜分析等應用配套,因此膜蛋白樣本制備成為一個難以逾越的挑戰(zhàn)。傳統(tǒng)制備膜蛋白樣品的方法是使用去污劑和表面活性劑增溶。去污劑處理會使膜蛋白喪失其天然結(jié)構(gòu),因而妨礙了膜蛋白的功能研究。
細菌膜蛋白提取試劑盒是一種基于化學方法的高產(chǎn)膜蛋白提取試劑盒。細菌膜蛋白提取試劑盒可以從各種菌體中提取膜蛋白,可用于純化蛋白的粗品制備及膜蛋白制備。提取過程簡單方便。
細菌膜蛋白提取試劑盒100T免費代測實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
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何首烏 Polygonum multiflorum Thunb. 2,3,5,4'-Tetraxy7noxystilbene- 2-Ο-β-D-glucoside 何首烏苷 55327-45-2 C20H22O9 ≥98%
楊梅速Myricqtin20mg/支
灰氈毛忍冬皂苷乙 Macranthoidin B 136849-88-2 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
對照品氧扶沙星130454-200403含量測定
Withaferin A醉茄素A純度:>98%
23325-78-2 頭孢安芐標準品 400mg
紫花前胡苷;紫花前胡甙;鬧達可寧Nodakenin;nodakenin;makerather492-31-8HPLC≥98%,20mg/支
3-Epiturraeanthin 3-EPITURRAEANTHIN 22415-24-3
Secobarbital CII司可*標準品76-73-3 200mg司可*標準品
肌酸 107-97-1 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
*Tripterygium wilfordii Triptoinoneonide 雷醌內(nèi)酯酮 163513-81-3 C20H22O4 ≥96%
異槲皮苷Isoquqrcitrin1637-2-20mg
歐當歸內(nèi)酯A;歐當歸內(nèi)酯 Levistilide A 88182-33-6 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
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β-桉葉醇;Β-桉葉醇 β-Eudesmol 51317-08-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
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