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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞凋亡檢測(cè)>> Annexin V Alexa Fluor647 / PI 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法
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更新時(shí)間:2017-07-06 08:47:24瀏覽次數(shù):357次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)procaspase-3激活劑200ul實(shí)驗(yàn)方法
Caspase 4抑制劑200ul實(shí)驗(yàn)方法
Annexin V Alexa Fluor647 / PI 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法BNL CL.2(小鼠胚胎肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
CL-0045C-33 A(人子細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
COL5A2 Others Human 人 COL5A2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
Ski細(xì)胞,人宮頸上皮細(xì)胞癌 人急性淋巴細(xì)胞白血病T淋巴細(xì)胞,CCRF-CEM細(xì)胞 大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞;IEC-6
中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞;V79
CPB1 Others Human 人 CPB1 / PCPB 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
Annexin V Alexa Fluor647 / PI 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng) 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
Annexin V Alexa Fluor647 / PI 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
Annexin V Alexa Fluor647 / PI 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
角膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基CEpiCM
IL1R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL1R1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人皮膚成纖維細(xì)胞;HSAS4
SUNE-1亞株-5-8F細(xì)胞,鼻咽癌細(xì)胞系 小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞,B16F10細(xì)胞 CM-H039人小腸粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
NRK(大鼠腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-26501 Follicle Dermal Papilla CellGrowth Medium, 真皮細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基(即用型) 500ml
NA Others H9N2 甲型流感 H9N2 (A/Hong Kong/1073/99) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
破骨細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠子細(xì)胞;U14-GFP
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 cDNA 腹水瘤細(xì)胞,SAC-IIB2細(xì)胞 VMR106細(xì)胞,大鼠骨肉瘤細(xì)胞
人胚肺二倍體細(xì)胞;2BS
CLEC4A Others Human 人 DCIR / CLEC4A / CLECSF6 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
小鼠V-Ets骨髓成紅細(xì)胞增多癥病毒E26癌基因同源物1(ETS1)ELISA試劑盒 ,英文名: ETS1 ELISA Kit
人血栓素A2(TX-A2)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanThromboxaneA2,TX-A2ELISAKit 96T/48T
大鼠肌酸激酶同工酶BB(CK-BB)免疫試劑盒 Rat creatine kinase BB isoenzyme,CK-BB ELISA kit
英文名稱RatCCL1ELISAKit大鼠CCL1規(guī)格:96T/48T
藍(lán)藻5-羥色胺-N-乙?;D(zhuǎn)移酶(SerotoninN-Acetyltransferase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitF1+2人*原片段F1+2規(guī)格:48T/96T
小鼠胱硫醚-r-裂解酶(CSE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Glycosylation of human glomerular tissue glycation end products (GTE-AGE) ELISA Kit 人腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物(GTE-AGE)ELISA試劑盒
HumanLeukotrieneC4,LT-C4ELISAKit 人白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanAnti-proteinase3antibodyIgG,PR3Ab-IgGELISA試劑盒人抗蛋白酶3抗體IgG(PR3Ab-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物細(xì)胞色素C釋放凋亡檢測(cè)試劑盒10次
Humantumorspecificantigen,TSAELISAKit人特異性抗原(TSA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Annexin V Alexa Fluor647 / PI 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法小鼠白介素15(IL-15)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠白介素13(IL-13)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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