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更新時間:2017-07-06 08:47:39瀏覽次數(shù):168次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)我司Annexin V Alexa Fluor647 / PI 細胞凋亡檢測試劑盒100T售后服務本著標準*、質量*、服務*、信譽*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務,咨詢!
Annexin V Alexa Fluor647 / PI 細胞凋亡檢測試劑盒100T售后服務實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
Annexin V Alexa Fluor647 / PI 細胞凋亡檢測試劑盒100T售后服務注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
BRL(大鼠肝細胞) 5×106cells/瓶×2
CL-0037BNL CL.2(小鼠胚胎肝細胞)5×106cells/瓶×2
PNLIPRP1 Others Human 人 PNLIPRP1 / PLRP1 人細胞裂解液 (陽性對照)
BI U-87細胞,膀胱癌細胞 總T淋巴細胞,OKT3細胞 大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞;RBL-1
中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1
CPA2 Others Human 人 CPA2 / Carboxypeptidase-A2 人細胞裂解液 (陽性對照)
腎小管上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
IL18RAP Others Mouse 小鼠 IL18RAP / IL1R7 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-C4
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO 1beta9,12.5 Clone 36 細胞,C127細胞 J774A.1細胞,鼠腹水單核細胞瘤
人胚肺成纖維細胞;WI-38 [WI38]
DCN Others Human 人 Decorin / DCN / SLRR1B 人細胞裂解液 (陽性對照)
CSNK2A2 Others Human 人 CSNK2A2 / CK2A2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
臍帶單核細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
小鼠淋巴瘤細胞;P388D1(IL-1)
H9c2細胞,大鼠心肌細胞 人肝癌細胞,HepG2/2-15細胞 CL-0128JeKo-1(人套細胞淋巴瘤細胞)5×106cells/瓶×2
二氫*還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr-
CD38 Others Human 人 CD38 人細胞裂解液 (陽性對照)
鵝3β羥基類固醇脫氫酶(3β-HSD)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血栓前體蛋白(TpP)免疫試劑盒 Human thrombus precursor protein,TpP ELISA Kit
人抗肌聯(lián)蛋白抗體(TTN)ELISA試劑盒 ,英文名: TTN ELISA Kit
RatInsulin-likegrowthfactorbindingprotein4,IGFBP-4ELISA試劑盒大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
humangastriccarcinomaMarkerELISA試劑盒人胃癌標志物ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanInterferonαAntibody,IFNα-AbELISAKit人抗α干擾素抗體(IFNα-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat leptin receptor (LR/Ob-R) ELISA Kit 大鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒
Human50%complementhemolysis,CH50ELISAKit 人血清總補體(CH50)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humananti-prothrombinsantibodies,aPT1/aPT2ELISA試劑盒人抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物細胞色素C釋放凋亡檢測試劑盒10次
Humantumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand4,TRAIL-R4ELISAKit人壞死因子相關凋亡誘導配體4(TRAIL-R4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Annexin V Alexa Fluor647 / PI 細胞凋亡檢測試劑盒100T售后服務小鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠白介素1(IL-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠八聚體結合轉錄因子4(OCT4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠基脲敏感性胺氧化酶(SSAO)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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