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更新時間:2017-07-06 08:55:36瀏覽次數(shù):126次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)昆蟲活性檢測試劑盒-AlamarBlue500T實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
昆蟲活性檢測試劑盒-AlamarBlue500T實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
昆蟲活性檢測試劑盒-AlamarBlue500T實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
CHO(倉鼠卵巢細胞) 5×106cells/瓶×2
CM-R098大鼠內臟脂肪細胞*培養(yǎng)基100mL
CD300A Others Human 人 CD300A 人細胞裂解液 (陽性對照)
KYSE510細胞,人食管癌細胞 人惡性膠質母細胞瘤細胞,U87MG細胞 鼬肺上皮細胞;MV-1-Lu
小鼠骨髓瘤細胞;Sp2/0-Ag14
CD226 Others Human 人 CD226 / DNAM-1 人細胞裂解液 (陽性對照)
綿羊皮膚細胞;OAR-S1
IL13RA2 Others Canine 狗 IL13RA2 / IL13R 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0141LLC-MK2(恒河猴腎細胞)5×106cells/瓶×2
B16-F1細胞,鼠黑色素瘤細胞系 血細胞瘤細胞系,Ramos細胞 倉鼠/小鼠雜交瘤細胞;145-2C11
AR42J(大鼠胰腺外分泌細胞) 5×106cells/瓶×2
CXADR Others Human 人 CXADR / CAR 人細胞裂解液 (陽性對照)
OPCML Others Mouse 小鼠 OBCAM / OPCML 人細胞裂解液 (陽性對照)
犬腎細胞;MDCK(NBL-2)
CL-0117HT-1080(人纖維肉瘤細胞)5×106cells/瓶×2
CoC1/DDP細胞,CoC1細胞耐藥亞株 分泌A2抗體B淋巴細胞,BB7.2細胞 615小鼠T細胞性白血病瘤株;L7712
AtT-20(小鼠垂體瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
CTSZ Others Mouse 小鼠 CTSX 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠轉鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血紅素氧合酶1(HO-1)免疫試劑盒 Human heme oxygenase 1,HO-1 ELISA Kit
人抗核仁抗體(ANA)ELISA試劑盒 ,英文名: ANA ELISA Kit
RatInterleukin1receptorantagonist,IL-1raELISA試劑盒大鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanglialcellline-derivedneurotrophicfactor,GDNFELISA試劑盒人膠質細胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanInterleukin1βconvertingenzyme,ICEELISAKit人白介素1β轉換酶(ICE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠高敏*狀腺原酸(u-T3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human eosinophil chemotactic protein Eotaxin 2 (Eotaxin 2/CCL24) ELISA Kit 人嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 2(Eotaxin 2/CCL24)ELISA試劑盒
Humanβ2-glycoprotein1antibodyIgA/G/M,β2-GP1IgA/G/MELISAKit 人β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1IgA/G/M)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humananti-thymocyteglobulin,ATGELISA試劑盒人抗胸腺細胞球蛋白(ATG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒20次
Humantransthyretin,TTRELISAKit人轉甲狀腺素蛋白(TTR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
昆蟲活性檢測試劑盒-AlamarBlue500T實驗方法豚鼠內皮素1(ET-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
豚鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
豚鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
豚鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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