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更新時(shí)間:2017-07-06 09:04:17瀏覽次數(shù):327次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)血管通透性測(cè)試染色試劑盒20ml免費(fèi)代測(cè)
細(xì)胞骨架染色試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法
破膜劑100ml免費(fèi)代測(cè)GBC-SD(人膽囊癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
CM-H042人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
LAYN Others Rat 大鼠 Layilin / LAYN 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
HCT116細(xì)胞,人結(jié)直腸癌細(xì)胞 人黑色素瘤細(xì)胞,HME1細(xì)胞 人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17
人整合SV40基因的上皮細(xì)胞;HBL-100 [HBL100]
BACE1 Others Mouse 小鼠 BACE-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
破膜劑100ml免費(fèi)代測(cè)使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng) 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
破膜劑100ml免費(fèi)代測(cè)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
破膜劑100ml免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(高分化);PC-12(高分化)
IL10RB Others Mouse 小鼠 IL10RB / IL10R2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
KYSE450 食管癌
RL95-2人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞 Human endometrial carcinoma cells RL95-2 D-MEM/F-12培養(yǎng)基+10%FBS
HGF Protein Mouse 重組小鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 (His 標(biāo)簽)
小小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(MM)(5×105) RBE, 人肝膽管癌細(xì)胞 Human
VEGFA Others Human 人 / 食蟹猴 VEGF / VEGFA / VEGF165 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞裂解物HBdSFL
人神經(jīng)元細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
NRK-49F細(xì)胞,大鼠腎成纖微細(xì)胞 RT4(膀胱癌細(xì)胞) 豹貓肺成纖維樣細(xì)胞;LCL3
EFNA3 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白 (His 標(biāo)簽)
C918(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 原代神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1ml
大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(TRAIL-R3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血管生成素2(ANG-2)免疫試劑盒 Human Angiopoietin 2,ANG-2 ELISA Kit
人抗鈣調(diào)素特異抗體(CAM-ab)ELISA試劑盒 ,英文名: CAM-ab ELISA Kit
RatInterleukin2,IL-2ELISA試劑盒大鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanGlucosetransporter1,GLUT1ELISA試劑盒人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanInterleukin-2receptor,IL-2RELISAKit人白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠二胺氧化酶(DAO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human mitogen activated protein kinase /MAP kinase (MAPK) ELISA Kit 人原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)ELISA試劑盒
Humanβ-subunitsofhemoglobin,HB-βELISAKit 人血紅蛋白β亞基(HB-β)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanAprotinin,APELISA試劑盒人*(AP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物乙醇脫氫酶總活性(NDMA)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
Humantissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
破膜劑100ml免費(fèi)代測(cè)兔子促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子促黃體激素(LH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子雌二醇(E2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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