當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細胞生物學(xué)試劑>>細胞氧化應(yīng)激>> *檢測試劑盒-比色法100T免費代測
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更新時間:2017-07-07 12:00:28瀏覽次數(shù):134次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)*檢測試劑盒-比色法100T免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
*檢測試劑盒-比色法100T免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
*檢測試劑盒-比色法100T免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
E.G7-OVA(小鼠T淋巴瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
硝基苯磷酸鈉(pNPP)磷酸酶檢測試劑盒pNPP
AGRP Others Mouse 小鼠 AGRP 人細胞裂解液 (陽性對照)
HOC1細胞,人卵巢癌細胞 C3H小鼠骨肉瘤細胞,LM8細胞 食管平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
CL-0060CHL(倉鼠肺細胞)5×106cells/瓶×2
HSAEpC Pellet 人小氣道上皮細胞團塊 > 1 mio.cells 人膀胱平滑肌細胞cDNAHBdSMC cDNA
CL-0178OVCAR-3(人卵巢癌細胞)5×106cells/瓶×2
FZD5 Others Mouse 小鼠 Frizzled-5 / FZD5 CHO細胞裂解液 (陽性對照)
人前脂肪細胞-皮下裂解物HPA-s L
小耳豬肺細胞;SEP-L1 癌細胞,MDA-MB-435S細胞 MA891細胞,小鼠癌細胞
人EB病毒轉(zhuǎn)化的B細胞;CGM1
HA Others H2N2 甲型流感 H2N2 (A/Canada/720/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
ACLY Others Human 人 ACLY / acly / ATP citrate lyase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人毛細胞RNAHHDPC miRNA5 μg
大耳山羊腎細胞;LDG-2
SK-N-MC細胞,神經(jīng)上皮瘤細胞 鼠骨髓瘤細胞,P3/NS1/1-Ag4-1細胞 人胃腺癌細胞;SGC-7901 [SGC7901]
小鼠Lewis肺癌瘤株;LLT
IL13RA2 Others Mouse 小鼠 IL13RA2 / CD213A2 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠纖溶酶原激活物抑制劑(PAI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胃泌酸調(diào)節(jié)素免疫試劑盒 human oxyntomodulin ELISA Kit
檸檬酸合酶(CS)測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
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HumaninhibinB,INH-BELISA試劑盒人抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanmelanomametastasissurfaceadhesionmolecule,MMSAMELISAKit人黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat angiotensin II (ANG- II) ELISA Kit 大鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒
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*檢測試劑盒-比色法100T免費代測人己糖激酶(HK)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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