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尿酸檢測試劑盒-比色法100T實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
尿酸檢測試劑盒-比色法100T實驗方法注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
H22(小鼠肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2
口腔角質細胞生長添加物OKGS
CD200 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD200 人細胞裂解液 (陽性對照)
HEC-1-B細胞,人子宮內膜腺癌細胞 大鼠腦膜細胞,RMC細胞 胰腺癌組織源性原代細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)/1ml
T-110B透明質酸酶(含100mL酶解緩沖液)10mL
HWP visceral Pellet 人類內臟白前脂肪細胞團塊 > 1 mio.cells 人真皮微血管內皮細胞總RNAHDMEC tRNA
視網膜muller細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
FSTL1 Others Mouse 小鼠 FSTL1 人細胞裂解液 (陽性對照)
雜交瘤(B類);C3110D2B2
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS4B 小鼠L6565白血病克隆細胞系,L6565細胞 RTG細胞,鮭魚胚胎細胞
人胚胎肌肉組織來源細胞;CCC-HSM-2
PVR Others Rat 大鼠 PVR / CD155 / NECL5 人細胞裂解液 (陽性對照)
人臍帶間葉干細胞(臍帶)(HUMSC) (5×105)
人腦瘤細胞;SF17
CM-R008大鼠支氣管成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
小鼠腎足細胞;Mouse podocyte 小鼠肝內膽管上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞 Mouse
GPA33 Others Mouse 小鼠 GPA33 / Glycoprotein A33 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠磷脂酶A2激活蛋白(PLAA)ELISA試劑盒 ,英文名: PLAA ELISA Kit
人胃泌素(Gastrin)ELISA檢測試劑盒HumanGastrinELISAKit 96T/48T
大鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)免疫試劑盒 Rat oxidized lowdensity lipoprotein antibody,OLAb ELISA Kit
英文名稱Ratt-PAELISAKit大鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)規(guī)格:96T/48T
鈣ATP酶SERCA蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25次
ELISAKitLipase人脂肪酶規(guī)格:48T/96T
兔子組織因子(TF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat vascular endothelial cell growth factor C (VEGF-C) ELISA Kit 大鼠血管內皮細胞生長因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒
humanphosphatidylinositolantibodyIgG/IgM,PIAb-IgG/IgMELISAKit 人磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCysticercosisantybody,CYTAbELISA試劑盒人囊蟲病抗體(CYTAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織HHV6-A(HUMANHERPESVIRUS6-A)病毒定量PCR擴增檢測試劑盒20次
Humanpleiotrophin,PTNELISAKit人多效生長因子(PTN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
尿酸檢測試劑盒-比色法100T實驗方法人肌球蛋白重鏈(MHC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人肌球蛋白輕鏈激酶(MLCK)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人肌球蛋白輕鏈(MLC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人肌球蛋白(Myosin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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