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更新時間:2017-07-07 12:03:18瀏覽次數(shù):239次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)尿酸酶檢測試劑盒-熒光法100T售后服務(wù)實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
尿酸酶檢測試劑盒-熒光法100T售后服務(wù)注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
H4-II-E-C3(大鼠肝癌細胞 ) 5×106cells/瓶×2
角質(zhì)細胞生長添加物(不含BPE)KGS-2
IFNGR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 人細胞裂解液 (陽性對照)
AN3 CA細胞,人子宮內(nèi)膜腺癌細胞 轉(zhuǎn)基因細胞,3T3/Fas/com細胞 原代表皮角化細胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml
T-106BIV型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL
HCM Pellet 人類心肌細胞團塊 > 1 mio.cells 人真皮成纖維細胞-新生兒總RNAHDF-n tRNA
猴腎細胞;Vero IgCD4
FST Others Mouse 小鼠 Follistatin / FST 人細胞裂解液 (陽性對照)
HPB-ALL(懸浮) T細胞白血病
769-P人腎細胞腺癌細胞 769-P human renal cell carcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
VEGFC Protein Rat 重組大鼠 VEGFC / VEGF-C 蛋白 (aa 108-223, Fc 標簽)
大鼠海馬趾星形膠質(zhì)細胞(RAh)(5×105) ACHN, 人腎細胞腺癌細胞 Human
IL6ST Others Cynomolgus 食蟹猴 IL6ST / gp130 人細胞裂解液 (陽性對照)
人腦瘤細胞;SF763
CM-H122人神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞*培養(yǎng)基100mL
(+)9811細胞,人胃癌細胞 人骨肉瘤細胞,SP20細胞 人胚胎眼鞏膜成纖維細胞;HFSF
DU 145(人前列腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2
CA12 Others Mouse 小鼠 Ca12 / Car12 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠細胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胃動素(MTL)免疫試劑盒 Human Motilin,MTL ELISA Kit
磷酸果糖激酶(PFK)測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣
RatplaetantibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISA試劑盒大鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humaninsulinautoantibodies,IAAELISA試劑盒人胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanmembraneIgA,mIgAELISAKit人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔子組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human matrix extracellular phosphoglycoprotein (MEPE) ELISA Kit 人細胞外基質(zhì)磷酸糖蛋白(MEPE)ELISA試劑盒
Humananti-prothrombinsantibodies,aPT1/aPT2ELISAKit 人抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21AELISA試劑盒人細胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織HHV6-A(HUMANHERPESVIRUS6-A)病毒定性檢測試劑盒20次
HumanPlaet-DerivedGrowthFactor-BB,PDGF-BBELISAKit人血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
尿酸酶檢測試劑盒-熒光法100T售后服務(wù)人肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人肌酐(Cr)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人活化素A(Activin-A)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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