當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細胞生物學(xué)試劑>>細胞氧化應(yīng)激>> 乙醇檢測試劑盒100T實驗方法
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更新時間:2017-07-07 12:30:32瀏覽次數(shù):139次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)乙醇檢測試劑盒100T實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
乙醇檢測試劑盒100T實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
乙醇檢測試劑盒100T實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
HKC(人胚腎上皮細胞) 5×106cells/瓶×2
內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基ECM
BMPR1B Others Human 人 BMPR1B / ALK-6 人細胞裂解液 (陽性對照)
PC-3M 2B4細胞,人前列腺癌細胞高轉(zhuǎn)移亞系 小鼠原B細胞株,BaF3細胞 人腸平滑肌細胞HISMC
CM-R113大鼠嗅鞘細胞*培養(yǎng)基100mL
5637(人膀胱癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H027人淋巴成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL 人腸微血管內(nèi)皮細胞RNAHIMEC miRNA5 μg
CL-000422RV1(人前列腺癌細胞)5×106cells/瓶×2
FKBP14 Others Human 人 FKBP14 人細胞裂解液 (陽性對照)
尿道上皮細胞生長添加物UCGS
HEC-1-A細胞,人子宮內(nèi)膜腺癌細胞 鼠雜交骨髓瘤細胞,K6H6/B5細胞 新生兒表皮角化細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
FC33(人胚胎腎細胞(Asp-2基因修飾)) 5×106cells/瓶×2
HWP subcutaneous Pellet 人類皮下白前脂肪細胞團塊 > 1 mio.cells 人少突膠質(zhì)前體細胞(懸浮生長)總RNAHOPC-os tRNA
CD2 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD2 人細胞裂解液 (陽性對照)
人腦血管周細胞裂解物HBVCL
人T淋巴細胞白血病細胞;HuT 78
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-3E6 木瓜蛋白酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL
WM35, 人黑色素瘤細胞 Human
CHL1 Others Human 人 CHL1 / CALL 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠突觸蛋白1(Syn1)ELISA試劑盒 ,英文名: Syn1 ELISA Kit
人胃癌標(biāo)志物ELISA檢測試劑盒humangastriccarcinomaMarkerELISAKit 96T/48T
倉鼠白介素6(IL-6)免疫試劑盒 Hamster Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit
CLIAKitforPTK/CD115(Humanproteintyrosinekinase)ELISAKit人蛋白*激酶規(guī)格:48T/96T
石蠟切片中性脂質(zhì)蘇丹黑間接染色試劑盒10次
ELISAKitGAD-Ab人*脫羧酶自身抗體規(guī)格:48T/96T
兔子氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat angiopoietin 2 (ANG-2) ELISA Kit 大鼠血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒
HumanAnti-mitochondriaautoantibodies,AMAELISAKit 人抗線粒體抗體(AMA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humancytotoxin,CTXELISA試劑盒人細胞毒素(CTX)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織IKKα激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
Humanplasminogenactivator,PLGAELISAKit人纖溶酶原激活劑(PLGA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
乙醇檢測試劑盒100T實驗方法人*S轉(zhuǎn)移酶(GSTs)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人*(GSH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人谷酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人谷酸脫羧酶(GAD)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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