當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細胞生物學(xué)試劑>>細胞氧化應(yīng)激>> 抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)檢測試劑盒120T免費代測
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更新時間:2017-07-07 12:41:19瀏覽次數(shù):93次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)檢測試劑盒120T免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)檢測試劑盒120T免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)檢測試劑盒120T免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
NCI-H157(人非小細胞肺腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2
支氣管成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
FZD4 Others Rat 大鼠 Frizzled-4 / FZD4 人細胞裂解液 (陽性對照)
Daudi細胞,人白血病細胞 小鼠腎足細胞,Mouse podocyte細胞 骨骼肌細胞培養(yǎng)基SkMCM-prf
CM-H024人胰腺星狀細胞*培養(yǎng)基100mL
BEL-7404(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M006小鼠肺成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL 人成骨肉瘤細胞;Saos-2
CL-0034BHK-21(倉鼠腎細胞)5×106cells/瓶×2
FCGR3A Others Human 人 CD16a / FCGR3A CHO細胞裂解液 (陽性對照)
磷酸鹽緩沖注DPBS
大額牛皮膚細胞;BFR-S3 非洲綠猴腎細胞,VERO細胞 PC-3(前列腺癌細胞)
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KM9401
THY1 Others Mouse 小鼠 THY1 / CD90 人細胞裂解液 (陽性對照)
DDR2 Others Human 人 DDR2 Kinase / CD167b (aa 422-855) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人胚肺二倍體細胞;KMB-17
CL-0355HFT-8810(人胎兒胸腺細胞株)5×106cells/瓶×2
CHO, 中國倉鼠卵巢細胞系 人T細胞淋巴瘤,Jurkat E6-1細胞 THLE-3(人肝上皮細胞)
人胰腺癌細胞;AsPC-1
VSIG4 Others Mouse 小鼠 VSIG4 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠腫瘤壞死因子受體超家族成員11A(TNFRSF11A/RANK)ELISA試劑盒 ,英文名: TNFRSF11A/RANK ELISA Kit
人微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA檢測試劑盒Humanmicrotransferrinuria,MTFELISAKit 96T/48T
大鼠不對稱二甲基*(ADMA)免疫試劑盒 Rat asymmetrical dimethylarginine,ADMA ELISA Kit
CLIAKitforTNF-Alpha(HumanTumornecrosisfactorAlpha)ELISAKIT人腫瘤壞死因子α規(guī)格:48T/96T
全組織肌腺苷酸脫氨酶(Myoadenylatedeaminase)活性染色試劑盒10次
ELISAKitanti-cartilage-Ab人抗軟骨抗體規(guī)格:48T/96T
兔子*Ⅱ(FⅡ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human adenosine three phosphate binding cassette transporter A1 (ABCA1) ELISA Kit 人腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1(ABCA1)ELISA試劑盒
Humantrypsinogenactivationpeptide,TAPELISAKit 人*原激活肽(TAP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanDopamineD1receptor,D1RELISA試劑盒人多巴胺D1受體(D1R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織NAD依賴性甘油醛-3-磷酸脫氫酶(NAD-Glyceraldehyde-3-PhosphateDehydrogenase;NAD-GAPDH)活性光譜法定量檢測試劑盒20次
Humanphospho-extracellularsignal-regulatedkinase,pERKELISAKit人磷酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)檢測試劑盒120T免費代測人蛋白激酶B(PKB)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人蛋白激酶A(PKA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人蛋白二硫化物異構(gòu)酶前體(PDI)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人蛋白二硫化物異構(gòu)酶A3(PDIA3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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