我司丙酮酸激酶(PK)定性檢測試劑盒50T售后服務本著標準*、質(zhì)量*、服務*、信譽*的宗旨，為客戶提供輕松便捷，安全可靠的網(wǎng)上采購模式！我們將竭誠為您服務,咨詢！
丙酮酸激酶(PK)定性檢測試劑盒50T售后服務實驗操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細胞懸液每50～100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光；而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞，CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同，需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞：
（1）取 10～60 萬細胞，重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中，細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細胞。棄上清，注意盡量不要吸除細胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
丙酮酸激酶(PK)定性檢測試劑盒50T售后服務注意事項
（1）本試劑只適用于實驗，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時請注意避光。在處理和標記時，盡可能在暗處進行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細胞，盡量在4℃下操作，以免影響細胞狀態(tài)。
（5）在細胞洗滌的后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會影響實驗結果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
（7）PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
NCI-H1703(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2

原代神經(jīng)膠質(zhì)細胞特制基礎培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/250/100ml

ADAM17 Others Rat 大鼠 ADAM17 人細胞裂解液 (陽性對照)

6T-CEM細胞，人T細胞白血病細胞 綠色熒光蛋白標記小鼠子細胞,U14-GFP細胞 前脂肪細胞分化培養(yǎng)基PADM-prf

CM-H008人氣管上皮細胞*培養(yǎng)基100mL

BHK-21(倉鼠腎細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M022小鼠甲狀腺上皮細胞*培養(yǎng)基100mL 人B淋巴細胞瘤細胞;RAMOS
結腸癌組織源性原代細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)/1ml

FCGR3 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD16 / FCGR3 人細胞裂解液 (陽性對照)

INS-1 大鼠胰島素細胞

中國倉鼠卵巢細胞系;CHO-TGF-beta-3/2000 Carrying Psv2-beta-TGF

LncaP, 人前列腺癌細胞

人急性T淋巴細胞白血病細胞;Jurkat, Clone E6-1 大鼠肝動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
RNASE1 Others Human 人 RNase A / Ribonuclease A / RNASE1 人細胞裂解液 (陽性對照)

人胚肺二倍體細胞;KMB-17

骨髓間質(zhì)干細胞 Adult bone marrow mesenchymal stem cells

HME1細胞，人黑色素瘤細胞 長雙歧桿菌 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;Mao

U14-GFP(小鼠子細胞) 5×106cells/瓶×2

HuH-6(人肝母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 RBE, 人肝膽管癌細胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0906
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