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更新時間:2017-07-07 13:12:28瀏覽次數(shù):333次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)脂肪酶(LPS)檢測試劑盒100T使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
脂肪酶(LPS)檢測試劑盒100T使用說明書操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
脂肪酶(LPS)檢測試劑盒100T使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
NCI-H295R(人腎上腺皮質(zhì)腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2
胎盤羊膜細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
FLT1 Others Rat 大鼠 VEGFR1 / FLT-1 人細胞裂解液 (陽性對照)
Jurkat D,E細胞,人T淋巴瘤轉(zhuǎn)基因細胞 615小鼠癌瘤株,Ca759細胞 多聚賴氨酸10 mg/mlPLL
非洲綠猴腎細胞;GL-37
C127(小鼠癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M124小鼠脈絡膜血管細胞*培養(yǎng)基100mL 人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤;U-87 MG [U87MG;U87 MG]
大鼠主動脈平滑肌細胞
FCGR2A Others Human 人 CD32a / FCGR2A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人主動脈內(nèi)皮細胞RNAHAEC miRNA5 μg
SK-N-SH細胞,神經(jīng)母細胞瘤 人肺腺鱗癌細胞,NCI-H596細胞 人腦血管平滑肌細胞
豚鼠源細胞
CD28 Others Mouse 小鼠 CD28 人細胞裂解液 (陽性對照)
ADAM9 Others Mouse 小鼠 ADAM9 人細胞裂解液 (陽性對照)
人胚腎細胞(亞系克隆);FIP293
HCC827 人非小細胞肺癌細胞
2V6.11人胚腎細胞 Human embryonic kidney cell line 2V6.11 MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS
TNF Protein Ferret 重組雪貂 TNF-alpha / TNFA 蛋白
人成纖維細胞(HMF)(5×105) HuH-7人肝癌細胞 Human
小鼠γ-基丁酸(γABA)ELISA試劑盒 ,英文名: γABA ELISA Kit
人網(wǎng)膜素(omentin)ELISA檢測試劑盒HumanomentinELISAKit 96T/48T
大鼠堿性成纖維細胞生長因子4(bFGF-4)免疫試劑盒 Rat fibroblast growth factor 4,FGF4 ELISA Kit
英文名稱RatFLT3ELISAKIT大鼠FMS樣*激酶3(FLT3)規(guī)格:96T/48T
抗體/蛋白HRP標記制備試劑盒5次
ELISAKitPTGDS人前列腺素D合成酶規(guī)格:48T/96T
兔子免疫球蛋白A(IgA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human cardiac troponin I (cTn- I) ELISA Kit 人心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒
Humananti-Bburgdorleriantibody,BB-AbELISAKit 人抗BB抗體(BB-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanE-Cadherin,E-CadELISA試劑盒人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織PAR1Bα激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanPerforin/Pore-formingprotein,PF/PFPELISAKit人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
脂肪酶(LPS)檢測試劑盒100T使用說明書人垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人垂草扁桃酸(VMA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人傳染性單核細胞增多癥抗體(IM-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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