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脂肪酶(LPS)檢測(cè)試劑盒100T使用說明書

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更新時(shí)間:2017-07-07 13:12:28瀏覽次數(shù):339次

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脂肪酶(LPS)檢測(cè)試劑盒100T使用說明書使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
脂肪酶(LPS)檢測(cè)試劑盒100T使用說明書操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)515min
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
脂肪酶(LPS)檢測(cè)試劑盒100T使用說明書實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細(xì)胞;
3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS4)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細(xì)胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
5Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL1×Binding Buffer
NCI-H295R(人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

胎盤羊膜細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

FLT1 Others Rat 大鼠 VEGFR1 / FLT-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

Jurkat D,E細(xì)胞,人T淋巴瘤轉(zhuǎn)基因細(xì)胞 615小鼠癌瘤株,Ca759細(xì)胞 多聚賴氨酸10 mg/mlPLL

非洲綠猴腎細(xì)胞;GL-37

C127(小鼠癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M124小鼠脈絡(luò)膜血管細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL 人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤;U-87 MG [U87MG;U87 MG]
大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

FCGR2A Others Human CD32a / FCGR2A 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞RNAHAEC miRNA5 μg

SK-N-SH細(xì)胞,神經(jīng)母細(xì)胞瘤 人肺腺鱗癌細(xì)胞,NCI-H596細(xì)胞 人腦血管平滑肌細(xì)胞

豚鼠源細(xì)胞

CD28 Others Mouse 小鼠 CD28 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
ADAM9 Others Mouse 小鼠 ADAM9 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

人胚腎細(xì)胞(亞系克隆);FIP293

HCC827 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

2V6.11人胚腎細(xì)胞 Human embryonic kidney cell line 2V6.11 MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS

TNF Protein Ferret 重組雪貂 TNF-alpha / TNFA 蛋白

人成纖維細(xì)胞(HMF)(5×105) HuH-7人肝癌細(xì)胞 Human
小鼠γ-基丁酸(γABA)ELISA試劑盒 ,英文名: γABA ELISA Kit

人網(wǎng)膜素(omentin)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanomentinELISAKit 96T/48T

大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子4(bFGF-4)免疫試劑盒 Rat fibroblast growth factor 4,FGF4 ELISA Kit

英文名稱RatFLT3ELISAKIT大鼠FMS樣*激酶3(FLT3)規(guī)格:96T/48T

抗體/蛋白HRP標(biāo)記制備試劑盒5

ELISAKitPTGDS人前列腺素D合成酶規(guī)格:48T/96T
兔子免疫球蛋白A(IgA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human cardiac troponin I (cTn- I) ELISA Kit 人心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-)ELISA試劑盒

Humananti-Bburgdorleriantibody,BB-AbELISAKit 人抗BB抗體(BB-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanE-Cadherin,E-CadELISA試劑盒人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織PAR1Bα激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20

HumanPerforin/Pore-formingprotein,PF/PFPELISAKit人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
脂肪酶(LPS)檢測(cè)試劑盒100T使用說明書人垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人垂草扁桃酸(VMA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人傳染性單核細(xì)胞增多癥抗體(IM-AbELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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