當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞氧化應(yīng)激>> ROS活性氧檢測試劑盒(cellRox Green)200T使用說明書
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更新時間:2017-07-07 13:12:17瀏覽次數(shù):796次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)ROS活性氧檢測試劑盒(cellRox Green)200T使用說明書NCTC 1469(小鼠正常肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
腮腺細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
STC2 Others Human 人 STC2 / Stanniocalcin 2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
BB7.2細(xì)胞,人分泌A2抗體B淋巴細(xì)胞 KM小鼠子瘤株,U27細(xì)胞 人小膠質(zhì)細(xì)胞裂解物HML
豬源細(xì)胞
CaES-17(人食管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0038BRL(大鼠肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 小鼠淋巴細(xì)胞白血病;L1210
ROS活性氧檢測試劑盒(cellRox Green)200T使用說明書使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
ROS活性氧檢測試劑盒(cellRox Green)200T使用說明書操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
ROS活性氧檢測試劑盒(cellRox Green)200T使用說明書實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
FCGR1 Others Mouse 小鼠 CD64 / FCGR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
HSC-T6 大鼠肝星形細(xì)胞
犬腎細(xì)胞;MDCK/IgR
5637, 人膀胱癌細(xì)胞
人喉癌上皮細(xì)胞;Hep-2 大鼠食管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
SEZ6L2 Others Human 人 SEZ6L2 / PSK-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人胚腎細(xì)胞;293 Cells, low passage
CL-0392NCI-H2087(人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
ZC-7901細(xì)胞,草魚吻端細(xì)胞 人白血病*耐藥株,HL-60/Ad細(xì)胞 人類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5538SKIN
散鱗鏡鯉尾鰭細(xì)胞;YZ21
CD209 Others Human 人 CD209 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠母系蛋白2(MATN2)ELISA試劑盒 ,英文名: MATN2 ELISA Kit
人外顯肽(extein)ELISA檢測試劑盒HumanexteinELISAKit 96T/48T
大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP-6)免疫試劑盒 Rat insulin-like growth factor binding protein 6,IGFBP-6 ELISA Kit
英文名稱Human8-hydroxy-2-deoxyguanosineELISAKit人8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)規(guī)格:96T/48T
糞便DNA高質(zhì)純化試劑盒20次
ELISAKitTAF人腫瘤血管生長因子規(guī)格:48T/96T
兔子可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human neonatal thyroid stimulating hormone (N-TSH) ELISA Kit 人新生兒促甲狀腺素(N-TSH)ELISA試劑盒
Humanpolymyositis-sclerosisantibody,PM-Scl/PM-1ELISAKit 人抗多發(fā)性肌炎硬皮病抗體(PM-Scl/PM-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanEndocrineglandvascularendothelialgrowthfactor,EG-VEGFELISA試劑盒人內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織PIM2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
humanPepsinogenA,PG-AELISAKit人*原A(PG-A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
ROS活性氧檢測試劑盒(cellRox Green)200T使用說明書人補(bǔ)體片段3b受體(C3bR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白(CCP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人補(bǔ)體蛋白4(C4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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