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更新時(shí)間:2017-07-10 09:59:47瀏覽次數(shù):176次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
TEMED 10ml售后服務(wù)使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
TEMED 10ml售后服務(wù)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
TEMED 10ml售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長,否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
CXCL9 Protein Mouse 重組小鼠 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白
人子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CD59 Others Rat 大鼠 CD59 / CD59A / MAC / IP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
FO細(xì)胞,小鼠骨髓瘤細(xì)胞 3T6-Swiss albino(胚胎成纖維細(xì)胞) 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(人膀胱癌細(xì)胞污染);ECV-304 [ECV304;ECV 304]
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KM9803
S-180(小鼠肉瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人 Niemann-Pick disease type C2 / NPC2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
真皮成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
EDAR Others Cynomolgus 食蟹猴 EDAR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
敘利亞倉鼠細(xì)胞系;Syrian Hamster AV12
Calu-3細(xì)胞,人肺腺癌細(xì)胞(胸膜滲出液) 大鼠肝星形細(xì)胞,CFSC-8B細(xì)胞 CM-M089小鼠皮膚肥大細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
SiHa(人子宮頸鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
HUVEC-c 單一來源的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC) 500,000cells 表皮角化細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
IFNGR2 Others Mouse 小鼠 IFNGR2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞裂解物HRCEpiCL
BHK-21 [C-13] 倉鼠腎成纖維細(xì)胞
CL-0142LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
細(xì)胞名稱
SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞;hFOB 1.19 人心房肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
小鼠磷脂酰肌醇特異性磷酯酶Cβ1(PLCβ1)ELISA試劑盒 ,英文名: PLCβ1 ELISA Kit
人松弛肽/松弛素(RLN)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanRelaxin,RLNELISAKit 96T/48T
大鼠*(FA)免疫試劑盒 Rat Folic acid,FA ELISA Kit
英文名稱*脫羧酶抗體規(guī)格:96T/48T
伽藍(lán)(kalanchoe)增殖培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
ELISAKitLTA人脂磷壁酸規(guī)格:48T/96T
山羊胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat free thyroxine (FT4) ELISA Kit 大鼠游離甲狀腺素(FT4)ELISA試劑盒
HumanHepatitisGvirusIgG,HGV-IgGELISAKit 人庚型肝炎病毒IgG(HGV-IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humangrowthhormonereleasinghormone,GHRHELISA試劑盒人促生長激素釋放激素(GHRH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織對(duì)氧磷酶3(PON3)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒
HumanmembraneIgA,mIgAELISAKit人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
TEMED 10ml售后服務(wù)大鼠轉(zhuǎn)化生長因于α(TGFα)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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