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更新時間:2017-07-10 10:04:20瀏覽次數(shù):145次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)PAGE不連續(xù)凝膠電泳緩沖液(5×)500ml實驗方法CCL7 Protein Human 重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白 (His 標簽)
人腎動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
IL1R2 Others Mouse 小鼠 IL1R2 / CD121b 人細胞裂解液 (陽性對照)
RH-35細胞,大鼠肝癌細胞 HeLa(細胞) EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY1036
人胚腎細胞;293 [HEK-293]
SK-MES-1(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 Alpha 1 Antitrypsin / SerpinA1a 人細胞裂解液 (陽性對照)
PAGE不連續(xù)凝膠電泳緩沖液(5×)500ml實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
PAGE不連續(xù)凝膠電泳緩沖液(5×)500ml實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
PAGE不連續(xù)凝膠電泳緩沖液(5×)500ml實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
CM-H127人晶狀體上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
DPYS Others Human 人 DPYS / Dihydropyrimidinase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人軟骨細胞HC-a
羅猴胎腎細胞;MA104 腦膠質(zhì)瘤細胞,C6細胞 NCI-H446 [H446](小細胞肺癌細胞)
人前列腺癌細胞;DU 145 [DU145;DU-145]
TNFRSF14 Others Mouse 小鼠 HVEM / TNFRSF14 人細胞裂解液 (陽性對照)
ACO2 Others Human 人 ACO2 / Aconitase 2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人腎小管上皮細胞;HKC
長尾綠猴胚胎細胞;4179
786-O[786-0]細胞,腎透明細胞腺癌細胞 單核細胞白血病細胞,J-111細胞 人小細胞肺癌細胞;NCI-H209
KM小鼠子瘤株;U27
CD86 Others Human 人 CD86 / B7-2 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠核受體亞家族3C組成員1(NR3C1)ELISA試劑盒 ,英文名: NR3C1 ELISA Kit
人*蛋白酶(PRSS)ELISA檢測試劑盒Humanserineprotease,PRSSELISAKit 96T/48T
大鼠脫氫表雄酮硫酸酯(DHEA-S)免疫試劑盒 Rat Dehydroepiandrosterone sulfate,DHEA-S ELISA Kit
英文名稱RatHCYELISAKit大鼠同型半胱氨(HCY)規(guī)格:96T/48T
呼吸鏈依賴性純化線粒體氧化應(yīng)激活性氧(ROS)初級熒光測定試劑盒20次
ELISAKitANG-2人血管生成素2規(guī)格:48T/96T
山羊檢測(e)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human pancreatic inhibin (Pancreastatin) ELISA Kit 人胰抑制素(Pancreastatin)ELISA試劑盒
HumanhepatitisBvirusXAg,HBxAgELISAKit 人乙型肝炎病毒X抗原(HBxAg)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanHaptoglobin,Hpt/HPELISA試劑盒人結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織*肽酶(prolidase;PLD)克林納(Chinard)比色法定量檢測試劑盒20次
Humanmaturationpromotingfactor,MF/MPFELISAKit人促有絲分裂因子(MF/MPF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
PAGE不連續(xù)凝膠電泳緩沖液(5×)500ml實驗方法大鼠*肽(Glp-1)ELISA試劑盒 組裝/原裝
大鼠胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠胰島細胞抗體(ICA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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