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蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合物片劑(EDTA Free)20片免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合物片劑(EDTA Free)20片免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合物片劑(EDTA Free)20片免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
EREG Protein Mouse 重組小鼠 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 標簽)
大鼠食管上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
EPCAM Others Rat 大鼠 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 人細胞裂解液 (陽性對照)
OVCAR-3人卵巢癌細胞 Human ovarian cancer cell line OVCAR-3 1640+10%FBS
人臍動脈平滑肌細胞HUASMC
MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨細胞前體細胞) 5×106cells/瓶×2 嬰兒真皮成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
人小梁網細胞HTMC
CRP Others Rat 大鼠 CRP / C-reactive 人細胞裂解液 (陽性對照)
HMF 人肌肉組織來源細胞
CM-R019大鼠腮腺細胞*培養(yǎng)基100mL
RBE, 人肝膽管癌細胞
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY1022 人神經星形膠質細胞*培養(yǎng)基 100mL
NA Others H9N2 甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 神經氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人細胞裂解液 (陽性對照)
人羊膜上皮細胞
人胚肺成纖維細胞;MRC-5
狗腎惡性組織細胞增生癥細胞;DH82 胚胎成纖維細胞,3T3-Swiss albino細胞 L6細胞,大鼠骨骼肌成肌細胞
人臍靜脈內皮細胞(人膀胱癌細胞污染);ECV-304 [ECV304;ECV 304]
HA Others H4N6 甲型流感 H4N6 (A/mallard/Ohio/657/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠磷脂酶A2(PL-A2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人腎胺酶(RNLS/MAO-C)免疫試劑盒 Human Renalase/ Monoamine Oxidase-C,RNLS/MAO-C ELISA Kit
MousegranzymesA,Gzms-AELISAKit小鼠顆粒酶A(Gzms-A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人神經營養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA試劑盒人神經營養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanmaturationpromotingfactor,MPFELISA試劑盒人成熟促進因子(MPF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanplacentagrowthfactor,PLGFELISAKit人胎盤生長因子(PLGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand 1 (TRAIL-R1) ELISA Kit 人壞死因子相關凋亡誘導配體1(TRAIL-R1)ELISA試劑盒
Humanhypoxia-induciblefactor1α,HIF-1αELISAKit 人低氧誘導因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humaninduciblenitricoxidesynthase,iNOSELISA試劑盒人誘導型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織基質金屬蛋白酶(MMP-2)免疫捕獲檢測試劑盒20次
HumanLeucineaminopepridase,LAPELISAKit人亮氨酰氨基肽酶(LAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合物片劑(EDTA Free)20片免費代測大鼠肝脂酶(HL)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠肝型脂肪酸結合蛋白(L-FABP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠肝表達趨化因子(LEC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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