Leupeptin 5mg免費(fèi)代測使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測時，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
Leupeptin 5mg免費(fèi)代測操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請在1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Leupeptin 5mg免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
FGF17 Protein Human 重組人 FGF17 蛋白

大鼠胃粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

IGFBP1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IGFBP1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

Jurkat, Clone E6-1人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞 Jurkat, Clone and E6-1 in human T lymphocyte leukemia cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

人胃平滑肌細(xì)胞HGSMC

BC3H1(小鼠腦瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人表皮角質(zhì)細(xì)胞-HEK-a
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4B3

CPB2 Others Mouse 小鼠 Carboxypeptidase B2 / CPB2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

BT474 人導(dǎo)管癌細(xì)胞

WI-38人胚肺細(xì)胞 WI-38 in human embryo lung cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS

MSTN Protein Mouse 重組小鼠 GDF-8 / Myostatin / MSTN 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

人前列腺成纖維細(xì)胞(HPrF)(5×105) 人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞 Human
CD48 Others Rat 大鼠 CD48 / SLAMF2 / BCM1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人胰腺癌細(xì)胞;AsPC-1

兔骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 Rabbit bone marrow mesenchymal stem cells

SF-295細(xì)胞，人XG惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞 毛霉 人腸平滑肌細(xì)胞RNAHISMC miRNA5 μg

SF126(人腦瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

HCC827(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0385MFC-GFP(小鼠前胃癌細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記))5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-1
大鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(AMH)ELISA試劑盒 ，英文名： AMH ELISA Kit

人神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA檢測試劑盒HumanNeuron-specificenolase,NSEELISAKit 96T/48T

鴨子神經(jīng)肽Y(NP-Y)免疫試劑盒 Duck neuropeptide Y,NP-Y ELISA Kit

CLIAKitforPAF(Mouseplaetactivatingfactor)ELISAKit小鼠血小板活化因子規(guī)格：48T/96T

水中腸桿菌(E.coli)比色法定量檢測試劑盒20次

ELISAKitCP人瘢痕性天皰瘡抗體規(guī)格：48T/96T
人載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human tumor associated antigen (TAA) ELISA Kit 人相關(guān)抗原(TAA)ELISA試劑盒

HumanCaspase3,Casp-3ELISAKit 人胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humaninsulin-likegrowthfactors1,IGF-1ELISA試劑盒人胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-9)*明膠法比色定量檢測試劑盒20次

HumanLebtospiraIgMELISAKit人鉤端螺旋體IgM(Lebtospira)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Leupeptin 5mg免費(fèi)代測大鼠催產(chǎn)素(OT)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠促性腺素釋放素受體（GnRHR）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠*釋放激素(GnRH)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠促生長激素釋放激素(GRH)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝