柱式 DNA 膠回收試劑盒100 次*詳細介紹：

柱式 DNA 膠回收試劑盒100 次*產(chǎn)品及特點:
尿素-聚丙烯酰胺凝膠電泳(Urea PAGE)是目前分離 200 nt 以下的小片段 RNA，尤其是 20 nt 左右的 microRNA(miRNA)分子的主要方法，但是單獨 配制各種溶液十分繁瑣，為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點: 1. 一站式，含有電泳所需要的所有試劑，即開即用，十分方便，免去了 實驗人員稱取有毒物品。 2. 靈活，可以根據(jù)需要配制各種濃度的 Urea-PAGE，以便對長度各異 的 RNA 進行電泳。 3. 電泳后可直接用于 UV 觀察、銀染、膠回收、Northern 雜交和放射自 顯影等。 4. 使用新型緩沖液，可以防止甘油的干擾。
柱式 DNA 膠回收試劑盒100 次*使用方法：
一、準備工作
1. 用固相 RNase 清除劑清潔工作的臺面和器皿（詳見該產(chǎn)品的使用手冊）。
2. 配制 1 X 電泳緩沖液 將適量的 10X 電泳緩沖液用 RNase-free 水稀釋 10 倍，得到 1X 電泳緩 沖液待用。
3. 配制 10%過硫酸銨溶液 精確稱取約 100 mg 過硫酸銨到一干凈的 1.5 mL 離心管中，按每 1 mg 過硫酸銨加 10 uL RNase-free 水的比例加入 RNase-free 水，搖晃致溶， 立即使用。注意：放置時間不要超過一周。
二、配制凝膠
1. 估計所需要的凝膠溶液的體積，一般配制一塊 13 cm X 15 cm X 0.8 mm 的膠需要 15 mL 凝膠溶液，配制一塊 36 cm X 45 cm X 0.8 mm 的膠 需要 120 mL 凝膠溶液。
2. 新鮮的 40%的丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液的配制：在裝有 60g 丙烯酰 胺干粉的瓶中加入約 130 mL 自備的去離子水，然后將全部甲叉雙丙烯酰 胺加入到同一塑料瓶中（可以加少量丙烯酰胺溶液沖洗出來以避免粉末有 毒粉末飄出。甲叉雙丙烯酰胺溶解度低，不會溶解在這少量溶液中）。充 分搖晃混勻后所得溶液即 40%的 Acrylamide/Bis 溶液。配制 40%而非 30%的原因是這樣可以在下步留出足夠空間加尿素。
3. 根據(jù)所需要的凝膠溶液的體積，在一的干凈的三角瓶中按下表加入各成分
4. 攪拌并加熱到 40-50℃左右，直到尿素*溶解。
5. 冷卻到室溫后，將三角瓶接上真空系統(tǒng)抽真空處理 10-15 分鐘以充分去 除溶液中的氧氣（氧氣會降低聚合反應效率）。但如果實驗條件有限，此 步也可以省略。
6. 邊搖晃溶液變加入 50 uL TEMED 和 500 uL 10%過硫酸銨。注意：即 使選擇其他工作濃度的 Acrylamide/Bis，TEMED 和 10%過硫酸銨的用 量也不需要隨之改變。但如果配置的凝膠溶液的體積變化，TEMED 和 10%過硫酸銨的用量也要按比例改變。
7. 再充分搖晃約 30 秒后迅速灌膠，然后插入樣品梳。
8. 室溫放置 30-60 分鐘使膠凝固。
9. 將凝膠板放置在電泳裝置上后，在上下層分別加入適當量的 1X 電泳緩沖 液。如果不馬上使用，需要有濕紙將上樣孔端蓋住以防凝膠過度干燥。
10. 拔出梳子后用加樣槍吸取電泳緩沖液，充分將每個加樣空中未聚合的 Acrylamide/Bis、尿素和氣泡吹打出來。
柱式 DNA 膠回收試劑盒100 次*后續(xù)處理：
1. 染色觀察：將凝膠一面的玻璃板揭開，直接用仍然附著在另一玻璃板上的 凝膠進行各種染色，包括銀染（固定、漂洗、顯影和定影等步驟）、EB（每 100 mL 1×TBE 中加 20 uL 10mg/mL 的 EB 溶液）、天澤基因低毒核 酸染料 DNAgreen（每 100 mL 1×TBE 中加 10 uL DNAgreen 原液）。 UV 下觀察并拍照。
2. miRNA 回收：按上法用 EB 等染料染色后，UV 下確定所需要的 miRNA 條帶的位置，切膠后進行膠回收處理。
3. Northern 雜交：按上法用 EB 等染料染色后，UV 下確定所需要的 miRNA 條帶的位置，切膠后電轉(zhuǎn)移到帶正電的尼龍膜上，然后進行雜交處理。
4. 放射自顯影：如果 miRNA 樣品電泳前經(jīng)過同位素標記，則將凝膠一面的 玻璃板揭開，用濾紙將附著在另一玻璃板上的凝膠吸附過來，然后包上保 鮮膜，真空抽干，然后使膠跟 X 光片向?qū)χ眠M行放射自顯影。
豹貓肺成纖維樣細胞;LCL4

GFRA3 Others Mouse 小鼠 GFRA3 / GFR-alpha-3 人細胞裂解液 (陽性對照)

786-0 人腎透明細胞腺癌細胞

Hep G2人肝癌細胞 Hep G2 human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS

PDGFC Protein Mouse 重組小鼠 PDGF-C / SCDGF 蛋白 (Fc 標簽)

人支氣管上皮細胞(HBEpiC)(5×105 ) 細胞名稱 種屬
KLK7 Others Mouse 小鼠 KLK7 / Kallikrein 7 人細胞裂解液 (陽性對照)

人脈絡叢成纖維細胞cDNAHCPF cDNA

人前脂肪細胞*培養(yǎng)基 100mL

MC細胞，大鼠巨噬細胞 THP-1(人單核細胞) 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS4A

EFNB1 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (His 標簽)

BC-019(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠淋巴瘤細胞;P388D1(IL-1)
人脈絡叢成纖維細胞cDNAHCPF cDNA

KLK7 Others Mouse 小鼠 KLK7 / Kallikrein 7 人細胞裂解液 (陽性對照)

人前脂肪細胞*培養(yǎng)基 100mL

MC細胞，大鼠巨噬細胞 THP-1(人單核細胞) 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS4A

EFNB1 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (His 標簽)

BC-019(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠淋巴瘤細胞;P388D1(IL-1)
TPO ELISA Kit 大鼠甲狀腺過氧化物酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-ZNF217 鋅指脂蛋白217抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FUT1 巖藻糖轉(zhuǎn)移酶1抗體 規(guī)格 0.2ml

IL-16(Mouse Interleukin 16) ELISA Kit 小鼠白介素16 96T

Neuropeptide Y 英文名稱： 神經(jīng)肽Y抗體 0.1ml

Apolipoprotein CII/APOC2 英文名稱： 載脂蛋白C2抗體 0.2ml

Anti-ZNF217 鋅指脂蛋白217抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Goat Anti-Guinea pig IgG/AP 堿性磷酸酶(AP)標記的羊抗豚鼠IgG 0.1ml

FSD1L 英文名稱： 卷曲螺旋結構域蛋白10抗體 0.2ml

鈣蛋白酶抗體 Anti-Calpain 1 0.1ml

Anti-Nogo-B/A /FITC 熒光素標記軸索過度生長抑制因子-B/A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh POT1 端粒保護蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-ZAP-70/FITC 熒光素標記zeta相關蛋白70抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
柱式 DNA 膠回收試劑盒100 次*TH1/TH2 小鼠細胞內(nèi)細胞因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-FABP(brain) CT 腦型脂肪酸結合蛋白抗體(C端)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh MRF/C11orf9 髓鞘基因調(diào)控因子抗體 規(guī)格 0.2ml

MIS/AMH(Human Mullerian Inhibiting Substance/Anti-Mullerian hormone) ELISA Kit 人繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素 96T

SLC44A1 英文名稱： 溶質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白家族44成員1抗體 0.2ml

C2orf55 英文名稱： 2號染色體開放閱讀框55抗體 0.2ml

Anti-FABP(brain) CT 腦型脂肪酸結合蛋白抗體(C端)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml