miRNA PAGE 膠回收試劑盒40 次運(yùn)輸后續(xù)處理：
1. 染色觀察：將凝膠一面的玻璃板揭開(kāi)，直接用仍然附著在另一玻璃板上的 凝膠進(jìn)行各種染色，包括銀染（固定、漂洗、顯影和定影等步驟）、EB（每 100 mL 1×TBE 中加 20 uL 10mg/mL 的 EB 溶液）、天澤基因低毒核 酸染料 DNAgreen（每 100 mL 1×TBE 中加 10 uL DNAgreen 原液）。 UV 下觀察并拍照。
2. miRNA 回收：按上法用 EB 等染料染色后，UV 下確定所需要的 miRNA 條帶的位置，切膠后進(jìn)行膠回收處理。
3. Northern 雜交：按上法用 EB 等染料染色后，UV 下確定所需要的 miRNA 條帶的位置，切膠后電轉(zhuǎn)移到帶正電的尼龍膜上，然后進(jìn)行雜交處理。
4. 放射自顯影：如果 miRNA 樣品電泳前經(jīng)過(guò)同位素標(biāo)記，則將凝膠一面的 玻璃板揭開(kāi)，用濾紙將附著在另一玻璃板上的凝膠吸附過(guò)來(lái)，然后包上保 鮮膜，真空抽干，然后使膠跟 X 光片向?qū)χ眠M(jìn)行放射自顯影。

miRNA PAGE 膠回收試劑盒40 次運(yùn)輸詳細(xì)介紹：

miRNA PAGE 膠回收試劑盒40 次運(yùn)輸產(chǎn)品及特點(diǎn):
尿素-聚丙烯酰胺凝膠電泳(Urea PAGE)是目前分離 200 nt 以下的小片段 RNA，尤其是 20 nt 左右的 microRNA(miRNA)分子的主要方法，但是單獨(dú) 配制各種溶液十分繁瑣，為此天澤基因開(kāi)發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點(diǎn): 1. 一站式，含有電泳所需要的所有試劑，即開(kāi)即用，十分方便，免去了 實(shí)驗(yàn)人員稱取有毒物品。 2. 靈活，可以根據(jù)需要配制各種濃度的 Urea-PAGE，以便對(duì)長(zhǎng)度各異 的 RNA 進(jìn)行電泳。 3. 電泳后可直接用于 UV 觀察、銀染、膠回收、Northern 雜交和放射自 顯影等。 4. 使用新型緩沖液，可以防止甘油的干擾。
miRNA PAGE 膠回收試劑盒40 次運(yùn)輸使用方法：
一、準(zhǔn)備工作
1. 用固相 RNase 清除劑清潔工作的臺(tái)面和器皿（詳見(jiàn)該產(chǎn)品的使用手冊(cè)）。
2. 配制 1 X 電泳緩沖液 將適量的 10X 電泳緩沖液用 RNase-free 水稀釋 10 倍，得到 1X 電泳緩 沖液待用。
3. 配制 10%過(guò)硫酸銨溶液 精確稱取約 100 mg 過(guò)硫酸銨到一干凈的 1.5 mL 離心管中，按每 1 mg 過(guò)硫酸銨加 10 uL RNase-free 水的比例加入 RNase-free 水，搖晃致溶， 立即使用。注意：放置時(shí)間不要超過(guò)一周。
二、配制凝膠
1. 估計(jì)所需要的凝膠溶液的體積，一般配制一塊 13 cm X 15 cm X 0.8 mm 的膠需要 15 mL 凝膠溶液，配制一塊 36 cm X 45 cm X 0.8 mm 的膠 需要 120 mL 凝膠溶液。
2. 新鮮的 40%的丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液的配制：在裝有 60g 丙烯酰 胺干粉的瓶中加入約 130 mL 自備的去離子水，然后將全部甲叉雙丙烯酰 胺加入到同一塑料瓶中（可以加少量丙烯酰胺溶液沖洗出來(lái)以避免粉末有 毒粉末飄出。甲叉雙丙烯酰胺溶解度低，不會(huì)溶解在這少量溶液中）。充 分搖晃混勻后所得溶液即 40%的 Acrylamide/Bis 溶液。配制 40%而非 30%的原因是這樣可以在下步留出足夠空間加尿素。
3. 根據(jù)所需要的凝膠溶液的體積，在一的干凈的三角瓶中按下表加入各成分
4. 攪拌并加熱到 40-50℃左右，直到尿素*溶解。
5. 冷卻到室溫后，將三角瓶接上真空系統(tǒng)抽真空處理 10-15 分鐘以充分去 除溶液中的氧氣（氧氣會(huì)降低聚合反應(yīng)效率）。但如果實(shí)驗(yàn)條件有限，此 步也可以省略。
6. 邊搖晃溶液變加入 50 uL TEMED 和 500 uL 10%過(guò)硫酸銨。注意：即 使選擇其他工作濃度的 Acrylamide/Bis，TEMED 和 10%過(guò)硫酸銨的用 量也不需要隨之改變。但如果配置的凝膠溶液的體積變化，TEMED 和 10%過(guò)硫酸銨的用量也要按比例改變。
7. 再充分搖晃約 30 秒后迅速灌膠，然后插入樣品梳。
8. 室溫放置 30-60 分鐘使膠凝固。
9. 將凝膠板放置在電泳裝置上后，在上下層分別加入適當(dāng)量的 1X 電泳緩沖 液。如果不馬上使用，需要有濕紙將上樣孔端蓋住以防凝膠過(guò)度干燥。
10. 拔出梳子后用加樣槍吸取電泳緩沖液，充分將每個(gè)加樣空中未聚合的 Acrylamide/Bis、尿素和氣泡吹打出來(lái)。
豬腎傳代細(xì)胞;IBRS-2

GBP1 Others Human 人 GBP1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

木瓜蛋白酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL

PC9-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人肺癌細(xì)胞 PC9-EGFP-puro (lentiviral construct stable strain) in human lung cancer cells DMEM+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin

IL32 Protein Human 重組人 Interleukin-32 / IL-32 蛋白 (isoform alpha, His 標(biāo)簽)

人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞(HCSMC)(5×105 ) RLF, 大鼠淋巴成纖維細(xì)胞 Rattus
CD93 Others Human 人 CD93 / C1QR1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人慢性髓系白血病細(xì)胞;K562

MS751 人子宮頸表皮癌細(xì)胞

NCI-H661人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞 NCI-H661 large cell lung cancer cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

AIMP1 Protein Human 重組人 AIMP1 / EMAP2 / SCYE1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

人胚肺二倍體細(xì)胞;2BS 人前列腺成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
人慢性髓系白血病細(xì)胞;K562

CSF1R Others Mouse 小鼠 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

C57BL/6小鼠脂肪間質(zhì)干細(xì)胞 C57BL/6 mouse adipose mesenchymal stem cells

BE(2)C細(xì)胞，人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 乙型溶血性鏈球菌 人胚肝二倍體細(xì)胞;CCC-HEL-1

Sp2/0-Ag14(小鼠骨髓瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

HEp-2(人喉表皮樣癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0450SW 982(人滑膜肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 人上皮細(xì)胞;MCF-10A
Cys-C ELISA Kit 大鼠半*蛋白酶抑制劑/胱抑素CMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-YY1 核轉(zhuǎn)錄因子YY1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh G protein alpha Inhibitor 2 G蛋白α抑制蛋白2抗體 規(guī)格 0.2ml

IL-5(Mouse Interleukin 5) ELISA Kit 小鼠白介素5 96T

Nephrin 英文名稱： 腎小球細(xì)胞粘附分子受體抗體 0.1ml

APRT 英文名稱： 腺嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶抗體 0.2ml

Anti-YY1 核轉(zhuǎn)錄因子YY1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Goat Anti-Chicken IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的羊抗雞IgG 0.1ml

FUT7 英文名稱： 巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶7抗體 0.2ml

溴脫氧尿苷抗體 Anti-BrdU 0.1ml

Anti-SIGLEC11/FITC 熒光素標(biāo)記唾液酸結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素11抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PPAP2C 磷酸脂磷酸水解酶2抗體 規(guī)格 0.1ml

Anti-CD94/KLRD1/FITC 熒光素標(biāo)記NK細(xì)胞表面抑制性受體CD94抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
miRNA PAGE 膠回收試劑盒40 次運(yùn)輸MIP-1 Gamma 大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白-1γMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-E2F3 轉(zhuǎn)錄因子E2F-3抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh NALP6 富含*重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體 規(guī)格 0.2ml

Human thrombomodulin,TM ELISA Kit 人血栓調(diào)節(jié)蛋白 96T

SLC25A10 英文名稱： 線粒體二羧酸載體蛋白抗體 0.2ml

c-phycocyanin 英文名稱： C-藻藍(lán)素/藻藍(lán)蛋白/藻青蛋白抗體 0.2ml

Anti-E2F3 轉(zhuǎn)錄因子E2F-3抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml