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Cy3-dCTP 溶液,10mM25μL特點

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更新時間:2017-07-17 12:39:50瀏覽次數(shù):407次

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Cy3-dCTP 溶液,10mM25μL特點一般使用 0.1×SSC做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進(jìn)行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。

Cy3-dCTP 溶液,10mM25μL特點詳細(xì)說明書:

Cy3-dCTP 溶液,10mM25μL特點使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實驗前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液.
3. 37
反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70加熱 510 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 7 M CH3COONH4pH 4.5)。如使用 CH3COONa 乙醇沉淀時使其終濃度達(dá) 300 mM
6. 加入 87.5 μL2.5 倍)的冷無水乙醇,-20放置 3060 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 58 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時,乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時,請在第 8 步之后進(jìn)行。
Cy3-dCTP 溶液,10mM25μL特點確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 5-12,一般情況下可以在 55進(jìn)行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預(yù)雜交步驟 預(yù)雜交就是用不含探針的超級雜交液跟印跡膜進(jìn)行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會非特異地吸附探針分子的位點封閉,否則這些位點會吸附標(biāo)記的探 針,造成高背景。
1. 將結(jié)合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤。
2. 將濕潤的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預(yù)先封口,再剪掉一角, 留一個小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級雜交液的比例沿小口 加入超級雜交液,然后用塑料封口機(jī)將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒入溫度設(shè)定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 1-2 小時,延長到 12-16 小時亦可。注意保溫過程中塑料袋應(yīng)在不停 的搖動狀態(tài)中,使超級雜交液與印跡膜充分接觸。
Cy3-dCTP 溶液,10mM25μL特點步驟:
1. 如果標(biāo)記的探針是雙鏈核酸,則需經(jīng)變性處理。具體操作是:根據(jù)探針濃 度和雜交所需探針的量計算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產(chǎn)品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預(yù)雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機(jī)封口)。探針的加入量視探針標(biāo)記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應(yīng)加大,而對于檢測克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應(yīng)將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫,時間一般為 6-12 小時。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過程中,一定不要使印跡。
大鼠胰腺再生蛋白Ⅳ(REG4)ELISA試劑盒 ,英文名: REG4 ELISA Kit

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膠原蛋白酶消化試劑盒20毫升

ELISAKitVD2人維生素D2規(guī)格:48T/96T
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Rat thioredoxin reductase (TrxR) ELISA Kit 大鼠硫氧還蛋白還原酶(TrxR)ELISA試劑盒

humanglutamicaciddecarboxylaseautoantibody,GAD-AbELISAKit 人*脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humananti-neutrophilgranulesantibody,ANGAELISA試劑盒人抗中性粒細(xì)胞顆粒抗體(ANGA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物乳酸脫氫酶(LDH)總活性酶動力比色法定量檢測試劑盒20

HumanUltraSensitiveProstateSpecificAntigen,PSAUSELISAKit人超敏前列腺特異性抗原(PSA-US)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2-Arachidonoyl Glycerol-d5 50 ug     5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid, 2-glycerol-1,12,33-d5 ester; 2-AG-d5; 2-Arachidonoyl Glycerol-d5

3,4,6-Tri-O-benzyl-β-D-Mannopyranose 1,2-metxyl orthoacetate 100 mg     1,2-O-1-metxoxyetxylidene-3,4,6-tris-O-pxenylmetxyl-β-D-mannopyranose

mFluor Violet 510-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml     mFluor Violet 510-streptavidin conjugate 1 mg/ml

Resolvin D2 metxyl ester 100 ug     7S,16R,17S-trixy7noxy-4Z,8E,10Z,12E,14E,19Z-docosahexaenoic acid metxyl ester RvD2 metxyl ester|7S),16R),17S-Resolvin D2 metxyl ester Resolvin D2 metxyl ester

Linoelaidic Acid 1 g     9E,12E-octadecadienoic acid Linoelaidic Acid

2-nitno-5-thiobenzoic acid     TNB
Glucagon-Like Peptide 1 (7-37)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly

Z-F-R-AMCZ-Phe-Arg-AMC

[Lys0]-γ-1-MSH (41-58), amideLys-Tyr-Val-Met-Gly-His-Phe-Arg-Trp-Asp-Arg-Phe-Gly-NH2

Biotin-BradykininBiotin-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-Pro-Phe-Arg

Osteocalcin (45-49) (human)Phe-Tyr-Gly-Pro-Val
Cy3-dCTP 溶液,10mM25μL特點月桂酸Lauric acidCP250g

CA1251-100mg腺苷3'',5''環(huán)磷酸37839-81-9100mg0

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Relax-ISO Blood DNA Kit II50ml(血量)

Janus green5g

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