當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>RNA/DNA提取>>探針標記及檢測產(chǎn)品>> 柱式探針純化試劑盒10 次說明書
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更新時間:2017-07-17 12:39:31瀏覽次數(shù):169次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)柱式探針純化試劑盒10 次說明書使用方法:
一、交換反應 1. 實驗前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應液.
3. 37℃反應 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時使其終濃度達 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當 Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時,乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時,請在第 8 步之后進行。
柱式探針純化試劑盒10 次說明書詳細說明書:
柱式探針純化試劑盒10 次說明書確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預雜交步驟 預雜交就是用不含探針的超級雜交液跟印跡膜進行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會非特異地吸附探針分子的位點封閉,否則這些位點會吸附標記的探 針,造成高背景。
1. 將結(jié)合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤。
2. 將濕潤的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預先封口,再剪掉一角, 留一個小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級雜交液的比例沿小口 加入超級雜交液,然后用塑料封口機將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒入溫度設定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 溫 1-2 小時,延長到 12-16 小時亦可。注意保溫過程中塑料袋應在不停 的搖動狀態(tài)中,使超級雜交液與印跡膜充分接觸。
柱式探針純化試劑盒10 次說明書步驟:
1. 如果標記的探針是雙鏈核酸,則需經(jīng)變性處理。具體操作是:根據(jù)探針濃 度和雜交所需探針的量計算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產(chǎn)品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M 的 HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA 或 RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機封口)。探針的加入量視探針標記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應加大,而對于檢測克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫,時間一般為 6-12 小時。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過程中,一定不要使印跡。
大鼠胰脂肪酶(PL)ELISA試劑盒 ,英文名: PL ELISA Kit
人抗Q熱抗體(anti-Q-Ab)ELISA檢測試劑盒Humananti-Qfeverantibody,anti-Q-AbELISAKit 96T/48T
大鼠γ氨基丁酸(GABA)免疫試劑盒 Rat Gamma-aminobutyric acid,GABA ELISA Kit
CLIAKitforT4ELISAKit大鼠甲狀腺素規(guī)格:48T/96T
人體RUNX3基因重組表達載體(pCMV5-RUNX3)感受態(tài)菌DH-5α1毫升
ELISAKitCAM-ab人抗鈣調(diào)素特異抗體規(guī)格:48T/96T
鵝催乳素抗體(PRL-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血纖蛋白原γ鏈(FGG)免疫試劑盒 Human Fibrinogen Gamma Chain,FGG ELISA Kit
人抗酸性磷酸酶(TRACP)ELISA試劑盒 ,英文名: TRACP ELISA Kit
RatinhibitorysubunitofNF-κBα,IKBαELISA試劑盒大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanFreeTestoterone,F-TESTOELISA試劑盒人游離睪同(F-TESTO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanInterferoninducibleT-cellChemoattractant,I-TACELISAKit人干擾素誘導T細胞趨化因子(ITAC/CXCL11)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA試劑盒 48T/96T 試劑盒 組裝/原裝
Human neuronal apoptosis inhibitory protein (NAIP) ELISA Kit 人神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA試劑盒
humanParathyroidhormone,PTHELISAKit 人甲狀旁腺激素(PTH)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanAnti-nuclearAntibody,ANAELISA試劑盒人抗核抗體(ANA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物酸性蔗糖轉(zhuǎn)化酶(acidinvertase)總活性比色法定量檢測試劑盒20次
HumanultraEstriol,uE3ELISAKit人超敏游離雌三醇(uE3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2-Arachidonoyl Glycerol-d5 (500 ug) 5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid, 2-glycerol-1,1,2,3,3-d5 ester; 2-AG-d5; 2-Arachidonoyl Glycerol-d5
3,4,6-Tri-O-benzyl-β-D-Mannopyranose 1,2-(metxyl orthoacetate) (500 mg) 1,2-O-(1-metxoxyetxylidene)-3,4,6-tris-O-(pxenylmetxyl)-β-D-mannopyranose
mFluor Blue 570-標記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml mFluor Blue 570-streptavidin conjugate 1 mg/ml
Resolvin D2 metxyl ester (50 ug) 7S,16R,17S-trixy7noxy-4Z,8E,10Z,12E,14E,19Z-docosahexaenoic acid metxyl ester; RvD2 metxyl ester|7(S),16(R),17(S)-Resolvin D2 metxyl ester; Resolvin D2 metxyl ester
Linoelaidic Acid (5 g) 9E,12E-octadecadienoic acid; Linoelaidic Acid
D-( Ampicillin trihydrate
Glucagon-Like Peptide I (7-36), amide, humanHis-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-NH2
α- Bag Cell Peptide (1-8)Ala-Pro-Arg-Leu-Arg-Phe-Tyr-Ser
[Lys15]-Amyloid β-Protein (15-21)Lys-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala
Biotin-CRF (human, rat)Biotin-Ser-Glu-Glu-Pro-Pro-Ile-Ser-Leu-Asp-Leu-Thr-Phe-His-Leu-Leu-Arg-Glu-Val-Leu-Glu-Met-Ala-Arg-Ala-Glu-Gln-Leu-Ala-Gln-Gln-Ala-His-Ser-Asn-Arg-Lys-Leu-Met-Glu-Ile-Ile-NH2
Osteogenic Growth PeptideAla-Leu-Lys-Arg-Gln-Gly-Arg-Thr-Leu-Tyr-Gly-Phe-Gly-Gly
柱式探針純化試劑盒10 次說明書乙基本etxyl-benzenCP500mL
CA1231-10g流腺嘌呤321-30-210g0
ER0312Eco47 I4000 units
RNA Stabilization Reagent20ml
Kanamycin Sulfate100g
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