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聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)即用型封堵液 (NC ) 50mL特點(diǎn)使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實(shí)驗(yàn)前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液.
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時(shí)使其終濃度達(dá) 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時(shí),乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時(shí),請?jiān)诘?/span> 8 步之后進(jìn)行。
即用型封堵液 (NC ) 50mL特點(diǎn)確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進(jìn)行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預(yù)雜交步驟 預(yù)雜交就是用不含探針的超級雜交液跟印跡膜進(jìn)行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會非特異地吸附探針分子的位點(diǎn)封閉,否則這些位點(diǎn)會吸附標(biāo)記的探 針,造成高背景。
1. 將結(jié)合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤。
2. 將濕潤的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預(yù)先封口,再剪掉一角, 留一個小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級雜交液的比例沿小口 加入超級雜交液,然后用塑料封口機(jī)將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒入溫度設(shè)定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 溫 1-2 小時(shí),延長到 12-16 小時(shí)亦可。注意保溫過程中塑料袋應(yīng)在不停 的搖動狀態(tài)中,使超級雜交液與印跡膜充分接觸。
即用型封堵液 (NC ) 50mL特點(diǎn)步驟:
1. 如果標(biāo)記的探針是雙鏈核酸,則需經(jīng)變性處理。具體操作是:根據(jù)探針濃 度和雜交所需探針的量計(jì)算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產(chǎn)品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M 的 HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA 或 RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預(yù)雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機(jī)封口)。探針的加入量視探針標(biāo)記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應(yīng)加大,而對于檢測克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應(yīng)將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫,時(shí)間一般為 6-12 小時(shí)。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過程中,一定不要使印跡。
大鼠抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒 ,英文名: INH-A ELISA Kit
人可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA檢測試劑盒Humansolublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-2,VEGFR-2/sFLK-1ELISAKit 96T/48T
大鼠艾杜糖硫酸酯酶(IDS)免疫試劑盒 Rat iduronate sulfatase,IDS ELISA Kit
CLIAKitforTALLA-1/CD231(HumanT-cellacuymphoblasticleukemiaantigen)ELISAKit人T細(xì)胞急性淋巴母細(xì)胞白血病相關(guān)抗原規(guī)格:48T/96T
人體NK細(xì)胞*培養(yǎng)液100毫升
ELISAKitgp210人抗核膜糖蛋白210抗體規(guī)格:48T/96T
小鼠R-脊椎蛋白1(RSPO1)ELISA試劑盒 ,英文名: RSPO1 ELISA Kit
人血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA檢測試劑盒HumanSerumamyloidA,SAAELISAKit 96T/48T
大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)免疫試劑盒 Rat peroxisome proliferators activator receptors alpha,PPAR-α ELISA Kit
英文名稱U.S.Salmon.CT.ELISAKit超級鮭魚(U.S.Salmon.CT.)規(guī)格:96T/48T
磷酸二酯酶1(Phosphodiesterase1)0.25單位
ELISAKitET-1人內(nèi)皮素1規(guī)格:48T/96T
小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human growth factor (HGH) ELISA Kit 人生長因子(HGH)ELISA試劑盒
HumanGlucagon,GCELISAKit 人胰高血糖素(GC)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humananti-Sa-antibodyELISA試劑盒人抗Sa抗體(anti-Sa-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物細(xì)胞周期M期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒10次
humantryptophanyl-tRNAsynthetase,WARSELISAKit人色氨酰tRNA合成酶(WARS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
9(R)-HODE (25 ug) 9R-xy7noxy-10E,12Z-octadecadienoic acid; 9(R)-HODE
LEI-106 (5 mg)
Annexin V, TRITC標(biāo)記的 Annexin V, TRITC Labeled
Docosaenoyl Ethanolamide (10 mg) N-(2-xy7noxyetxyl)-13Z-docosenamide; Docosaenoyl Ethanolamide
α-Linolenic Acid (100 mg) 9Z,12Z,15Z-octadecatrienoic acid; ALA; α-Linolenic Acid
4-(3-Ethenyl-3,7-dimetxyl-1,6-octadienyl)pxenol Bakuchiol
G-P-RGly-Pro-Arg
α-Mating FactorTrp-His-Trp-Leu-Gln-Leu-Lys-Pro-Gly-Gln-Pro-Met-Tyr
[Nle27]-GRF (1-29) amide (human)Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Nle-Ser-Arg- NH2
Biotin-Neuropeptide Y (human, rat)Biotin-Tyr-Pro-Ser-Lys-Pro-Asp-Asn-Pro-Gly-Glu-Asp-Ala-Pro-Ala-Glu-Asp-Met-Ala-Arg-Tyr-Tyr-Ser-Ala-Leu-Arg-His-Tyr-Ile-Asn-Leu-Ile-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH2
P62 (417-429), M. lepraeLeu-Leu-Gln-Ala-Ala-Pro-Ala-Leu-Asp-Lys-Leu-Lys-Leu
即用型封堵液 (NC ) 50mL特點(diǎn)正辛烷OctaneAR500mL
Gelgreen---500ul0940
CG5611-5Gγ-Globulins(From Bovine) γ-球蛋白(牛)9007-83-45g
200bp DNA Ladder250ul
Lectin, from Triticum vulgaris
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