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更新時(shí)間:2017-07-17 12:46:30瀏覽次數(shù):258次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)硝酸纖維素膜,13×20cm1張說(shuō)明書步驟:
1. 如果標(biāo)記的探針是雙鏈核酸,則需經(jīng)變性處理。具體操作是:根據(jù)探針濃 度和雜交所需探針的量計(jì)算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產(chǎn)品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M 的 HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA 或 RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預(yù)雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機(jī)封口)。探針的加入量視探針標(biāo)記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測(cè)基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應(yīng)加大,而對(duì)于檢測(cè)克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應(yīng)將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫,時(shí)間一般為 6-12 小時(shí)。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過(guò)程中,一定不要使印跡。
硝酸纖維素膜,13×20cm1張說(shuō)明書使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實(shí)驗(yàn)前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液.
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時(shí)使其終濃度達(dá) 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無(wú)水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。 注:通過(guò)第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時(shí),乙醇沉淀后用凝膠過(guò)濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時(shí),請(qǐng)?jiān)诘?/span> 8 步之后進(jìn)行。
硝酸纖維素膜,13×20cm1張說(shuō)明書詳細(xì)說(shuō)明書:
硝酸纖維素膜,13×20cm1張說(shuō)明書確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進(jìn)行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預(yù)雜交步驟 預(yù)雜交就是用不含探針的超級(jí)雜交液跟印跡膜進(jìn)行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會(huì)非特異地吸附探針?lè)肿拥奈稽c(diǎn)封閉,否則這些位點(diǎn)會(huì)吸附標(biāo)記的探 針,造成高背景。
1. 將結(jié)合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤(rùn)。
2. 將濕潤(rùn)的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預(yù)先封口,再剪掉一角, 留一個(gè)小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級(jí)雜交液的比例沿小口 加入超級(jí)雜交液,然后用塑料封口機(jī)將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒(méi)入溫度設(shè)定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 溫 1-2 小時(shí),延長(zhǎng)到 12-16 小時(shí)亦可。注意保溫過(guò)程中塑料袋應(yīng)在不停 的搖動(dòng)狀態(tài)中,使超級(jí)雜交液與印跡膜充分接觸。
大鼠抑制素B(INHB)ELISA試劑盒 ,英文名: INHB ELISA Kit
Mouse immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit 小鼠免疫球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒
MouseP-SelectinELISAkit 小鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanDiphtheriaantibodyELISAKit人白喉抗體規(guī)格:48T/96T
細(xì)胞Akt/PKB激酶總活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitsmActinin-α大鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α規(guī)格:48T/96T
小鼠干擾素β(IFNβ)ELISA試劑盒 ,英文名: IFNβ ELISA Kit
人血清白蛋白(HSA)ELISA檢測(cè)試劑盒Humansreumalbumin,HSAELISAKit 96T/48T
大鼠神經(jīng)肽Y(NPY)免疫試劑盒 Rat neuropeptide Y,NPY ELISA kit
英文名稱RatPGE1ELISAKit大鼠前列腺素E1(PGE1)規(guī)格:96T/48T
活體細(xì)胞半*蛋白酶-8(PASE-8)活性原位熒光染色檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitFRA人纖維連接素相關(guān)抗原規(guī)格:48T/96T
小鼠骨保護(hù)素(OPG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human orexin receptor (OXR) ELISA Kit 人食欲素受體(OXR)ELISA試劑盒
HumanPancreastatinELISAKit 人胰抑制素(Pancreastatin)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humananti-scl70antibody,SCL70/topoⅠELISA試劑盒人抗硬皮病抗體70(SCL70/topoⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物細(xì)胞周期S期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒10次
Humantrypsinogenactivationpeptide,TAPELISAKit人*原激活肽(TAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
9(R)-HODE (100 ug) 9R-xy7noxy-10E,12Z-octadecadienoic acid; 9(R)-HODE
MA-CHMINACA (10 mg) AB-CHMINACA|AMB N-metxylcyclohexyl analog|MAB-AB-CHMINACA; metxyl (1-(cyclohexylmetxyl)-1H-indazole-3-carbonyl)-L-valinate
Annexin V-iFluor 488偶聯(lián)物 Annexin V-iFluor 488 conjugate
Docosaenoyl Ethanolamide (50 mg) N-(2-xy7noxyetxyl)-13Z-docosenamide; Docosaenoyl Ethanolamide
α-Linolenic Acid (250 mg) 9Z,12Z,15Z-octadecatrienoic acid; ALA; α-Linolenic Acid
4- KN-62
Granuliberin RPhe-Gly-Phe-Leu-Pro-Ile-Tyr-Arg-Arg-Pro-Ala-Ser-NH2
α-Melanocyte Stimulating Hormone (11-13)(MSHa)Lys-Pro-Val-NH2
[Nle4] a-MSH, amideAc-Ser-Tyr-Ser-Nle-Glu-His-Phe-Arg-Trp-Gly-Lys-Pro-Val- NH2
Biotin-Obestatin (rat)Biotin-Phe-Asn-Ala-Pro-Phe-Asp-Val-Gly-Ile-Lys-Leu-Ser-Gly-Ala-Gln-Tyr-Gln-Gln-His-Gly-Arg-Ala-Leu-NH2
P75-TNFR FragmentSer-Met-Ala-Pro-Gly-Ala-Val-His-Leu-Pro-Gln-Pro
硝酸纖維素膜,13×20cm1張說(shuō)明書過(guò)氧化十二酰Dilauroyl peroxide98%
L9309Gelred 核酸染色劑gelred--0.5ml0
291920-100GYNB 酵母氮源 (不含流胺)--100g
2xPCRmix GC-Rich Master1ml*5(with dye)
Leupeptin25mg
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