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更新時間:2017-07-17 13:10:39瀏覽次數(shù):90次
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dNTP 溶液,100mM 5mL價格使用方法:
1. 以 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
dNTP 溶液,100mM 5mL價格產(chǎn)品及特點:
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產(chǎn)物克隆到表達載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴增。
dNTP 溶液,100mM 5mL價格DNA 擴增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C)%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時間退火沒有必要。
dNTP 溶液,100mM 5mL價格詳細說明書:
15(R)-15-methyl Prostaglandin E2 (5 mg) 9-oxo-11。alpha。,15R-dihydroxy-15-methyl-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; Arbaprostil|15(R)-15-methyl PGE2; 15(R)-15-methyl Prostaglandin E2
BCECF-Acetoxymethyl ester (5 mg) BCECF-AM; 3’,6’-bis(acetyloxy)-5(or 6)-[[(acetyloxy)methoxy]carbonyl]-3-oxo-spiro[isobenzofuran-1(3H),9’-[9H]xanthene]-2’,7’-dipropanoic acid, 2’,7’-bis[(acetyloxy)methyl] ester
維生素B2(核黃素)(25GM) Riboflavin, 83-88-5; MW 376.36; USP
N-methyl-2-AI (hydrochloride) (5 mg) 2,3-dihydro-N-methyl-1H-inden-2-amine, monohydrochloride; NM-2AI|N-methyl-2-Aminoindane; N-methyl-2-AI (hydrochloride)
FK-409 (1 mg) 4-ethyl-2E-(hydroxyimino)-5-nitno-3E-hexenamide; NOR-3; FK-409
5-Methylisoxazole-4-(4-trifluoromethylcarboxanilide), N-(4-Trifluoromethylphenyl)-5-methylisoxazol-4-carboxamide; HWA486, Leflunomide
PtdIns-(3,4)-P2 (1,2-dipalmitoyl) (sodium salt) (100 ug) 1-(1,2R-dihexadecanoylphosphatidyl)inositol-3,4-bisphosphate, trisodium salt; Phosphatidylinositol-3,4-diphosphate C-16|DPPI-3,4-P2; PtdIns-(3,4)-P2 (1,2-dipalmitoyl) (sodium salt)
1-methyl-D-Tryptophan (5 g) 1-methyl-D-tryptophan
17(S)-HpDoHE (250 ug) 17S-hydroperoxy-4E,7Z,10Z,13Z,15Z,19Z-docosahexaenoic acid; 17(S)-hydroperoxy Docosahexaenoic Acid; 17(S)-HpDoHE
3-oxo Stearic Acid (500 ug) 3-oxo Octadecanoic Acid|β-keto Stearic Acid; 3-oxo-octadecanoic acid
Acridine Orange (10 g) N3,N3,N6,N6-tetramethyl-3,6-acridinediamine; C。I。 46005B|NSC 19435Acridine Orange
DiaEasy Dialyzer (20 ml) MWCO 1 kDa DiaEasy Dialyzer (20 ml) MWCO 1 kDa
13(S)-HODE cholesteryl ester (25 ug) 13S-xy7noxy-9Z,11E-octadecadienoic acid, cholesteryl ester; 13(S)-HODE cholesteryl ester
Darapladib (10 mg) SB 480848; N-[2-(dietxylamino)etxyl]-2-[[(4-fluoropxenyl)metxyl]thio]-4,5,6,7-tetraxy7no-4-oxo-N-[[4’-(trifluorometxyl)[1,1’-bipxenyl]-4-yl]metxyl]-1H-cyclopentapyrimidine-1-acetamide
鬼筆環(huán)肽-Fluorescein偶聯(lián)物 Phalloidin-Fluorescein Conjugate
Dibutyl-3-xy7noxybutyl Phosphate (25 mg) dibutyl 3-xy7noxybutyl esterdibutyl 3-xy7noxybutyl ester-phosphoric acid; TBP-OH; Dibutyl-3-xy7noxybutyl Phosphate
Elaidic Acid (1 g) 9E-octadecenoic acid; trans-Oleic Acid; Elaidic Acid
(3aR, Cantharidin
麥芽汁培養(yǎng)基250g用于霉菌和酵母菌增菌培養(yǎng)
乳糖肉湯(LB) 250(g) incubation media 乳糖肉湯(LB) 250(g)
葡萄糖銨發(fā)酵管 葡萄糖銨發(fā)酵管 20支 BR
SCDLP液體培養(yǎng)基250用于化妝品樣品制備,前增菌培養(yǎng)(GB標準)incubationmediaSCDLP液體培養(yǎng)基250用于化妝品樣品制備,前增菌培養(yǎng)(GB標準)
CCDASupplement
50%eggyolkemulsion
1%亞碲酸鉀溶液 5mL/支x10 incubation media 1%亞碲酸鉀溶液 5mL/支x10
三苯四唑營養(yǎng)瓊脂 TCC Nutrient Agar 250克 用于細菌總數(shù)測定時防止菌落蔓延
四硫磺酸鹽煌綠增菌液基礎(TTB)250用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng),需加入煌綠和碘液(GB、SN標準)incubationmedia四硫磺酸鹽煌綠增菌液基礎(TTB)250用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng),需加入煌綠和碘液(GB、SN標準)
煌綠瓊脂 250g 用于沙門氏菌的
dNTP 溶液,100mM 5mL價格瓊脂培養(yǎng)基O250g用于*的分離培養(yǎng)。
BAIRD-PARKER agar Staphylococcus selective agar base acc.to 1.05406.0500 MERCK默克 incubation media BAIRD-PARKER agar Staphylococcus selective agar base acc.to 1.05406.0500 MERCK默克
綠膿菌素測定用培養(yǎng)基(PDP) 250g 用于鑒別綠膿桿菌產(chǎn)生綠膿菌素試驗(GB15979-2002
dNTP 溶液,100mM 5mL價格變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94℃ 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95℃。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合
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