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dITP 溶液,2.5mM2mL運(yùn)輸

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更新時(shí)間:2017-07-17 13:11:27瀏覽次數(shù):170次

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dITP 溶液,2.5mM2mL運(yùn)輸是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。

dITP 溶液,2.5mM2mL運(yùn)輸產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
dITP 溶液,2.5mM2mL運(yùn)輸變性溫度與時(shí)間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會(huì)產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會(huì)啟動(dòng)。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會(huì)很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會(huì)影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95 退火溫度與時(shí)間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
dITP 溶液,2.5mM2mL運(yùn)輸DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯(cuò)配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進(jìn)行推測,一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時(shí)間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時(shí)間退火沒有必要。
dITP 溶液,2.5mM2mL運(yùn)輸詳細(xì)說明書:

dITP 溶液,2.5mM2mL運(yùn)輸使用方法:
1. 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
15S-15-methyl Prostaglandin E2 500 ug     9-oxo-11alpha。,15S-dihydroxy-15-methyl-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid 15S-15-methyl PGE2; 15S-15-methyl Prostaglandin E2

Caspofungin acetate 10 mg     L-743,872|MK 0991; 1-[4R,5S-5-[2-aminoethylamino]-N2-[10R,12S-10,12-dimethyl-1-oxotetradecyl]-4-hydroxy-L-ornithine]-5-[3R-3-hydroxy-lornithine]-pneumocandin B0 acetate 1:2

*(25GM     Rifampicin, 13292-46-1; MW 822.94; 97%

nitnacaine 1 mg     3-diethylamino-22-dimethylpropyl 4-nitnobenzoate; nitnacaine

FK-409 5 mg     4-ethyl-2E-hydroxyimino-5-nitno-3E-hexenamide; NOR-3; FK-409

N-4-Trifluoromethylphenyl-2-cyano-3-hydroxycrotonamide, 2-Cyano-3-hydroxy-N-[4-trifluoromethylphenyl]-2-butenamide     A77 1726
PtdIns-34-P2 1,2-dipalmitoyl sodium salt 1 mg     1-1,2R-dihexadecanoylphosphatidylinositol-3,4-bisphosphate, trisodium salt; Phosphatidylinositol-3,4-diphosphate C-16|DPPI-3,4-P2; PtdIns-3,4-P2 12-dipalmitoyl sodium salt

Ac-Calpastatin 184-210 1 mg     Calpastatin Peptide B27-WT

Cardiogenol C hydrochloride 1 mg     2-[[2-[4-methoxyphenylamino]-4-pyrimidinyl]amino]-ethanol; Cardiogenol C hydrochloride

25C-NBOH hydrochloride 10 mg     2;C-C-NBOH 2-[[[2-4-chloro-2,5-dimethoxyphenylethyl]amino]methyl]-phenol, monohydrochloride

Acridine Orange 5 g     N3,N3,N6,N6-tetramethyl-36-acridinediamine; CI。 46005B|NSC 19435Acridine Orange

DiaEasy Dialyzer (15 ml) MWCO 1 kDa     DiaEasy Dialyzer (15 ml) MWCO 1 kDa
13S-HODE cholesteryl ester 100 ug     13S-xy7noxy-9Z,11E-octadecadienoic acid, cholesteryl ester; 13S-HODE cholesteryl ester

Darapladib 5 mg     SB 480848; N-[2-dietxylaminoetxyl]-2-[[4-fluoropxenylmetxyl]thio]-4,5,6,7-tetraxy7no-4-oxo-N-[[4-trifluorometxyl[1,1-bipxenyl]-4-yl]metxyl]-1H-cyclopentapyrimidine-1-acetamide

鬼筆環(huán)肽-California Red偶聯(lián)物     Phalloidin-California Red Conjugate

Butylone-d3 xy7nochloride 1 mg     1-1,3-benzodioxol-5-yl-2-metxyl-d3-amino-1-butenone, monoxy7nochloride β-keto MBDB-d3; Butylone-d3 xy7nochloride

Elaidic Acid 50 mg     9E-octadecenoic acid; trans-Oleic Acid; Elaidic Acid

4a-     Pseudolaric Acid B
PALCAM瓊脂基礎(chǔ)26070250g用于單增李斯特氏菌的選擇性分離培養(yǎng)(GB4789.30-20/T0005)。

三糖鐵瓊脂 (CM0277) Oxoid incubation media 三糖鐵瓊脂 (CM0277) Oxoid

珊瑚鏈霉菌 /

contactsmedium

瓊脂培養(yǎng)基F 250g 用于腸道菌計(jì)數(shù)和腸桿菌科鑒別
*檢定培養(yǎng)基250g*效價(jià)測定

抗生素檢定培養(yǎng)基4 250(g) incubation media 抗生素檢定培養(yǎng)基4 250(g)

察氏培養(yǎng)基 250g 用于培養(yǎng)能以鹽作為*氮源的真菌和細(xì)菌,及青霉和曲霉等霉菌的分離培養(yǎng)和形態(tài)鑒別

酸水解酪蛋白250培養(yǎng)基原材料,提供細(xì)菌生長所需的生長因子incubationmedia酸水解酪蛋白250培養(yǎng)基原材料,提供細(xì)菌生長所需的生長因子

梭菌屬測定用培養(yǎng)基 250g 用于梭菌屬細(xì)菌檢測
dITP 溶液,2.5mM2mL運(yùn)輸ISP培養(yǎng)基250g用于鏈霉菌的培養(yǎng)

BactoTM瓊脂 優(yōu)化有益的鈣鎂離子比例同時(shí)減少有害離子含量 454g incubation media BactoTM瓊脂 優(yōu)化有益的鈣鎂離子比例同時(shí)減少有害離子含量 454g

頂青霉 耐高溫* /

亞鉍瓊脂平板(9cm)用于沙門氏菌的選擇性分離

WORT瓊脂 250g 用于真菌,特別是酵母菌的計(jì)數(shù)和增菌培養(yǎng)

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