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更新時間:2017-07-17 13:17:11瀏覽次數(shù):137次
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雙脫氧 dNTP 套裝40uL×4圖片詳細說明書:
雙脫氧 dNTP 套裝40uL×4圖片產(chǎn)品及特點:
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產(chǎn)物克隆到表達載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴增。
雙脫氧 dNTP 套裝40uL×4圖片變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94℃ 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95℃。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
雙脫氧 dNTP 套裝40uL×4圖片DNA 擴增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C)%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時間退火沒有必要。
雙脫氧 dNTP 套裝40uL×4圖片使用方法:
1. 以 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
16-phenoxy tetranor Prostaglandin E2 (5 mg) 9-oxo-11a,15R-dihydroxy-16-phenoxy-17,18,19,20-tetranor-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 16-phenoxy tetranor PGE2; 16-phenoxy tetranor Prostaglandin E2
5-Cyano-2,3-di-(p-tolyl)tetrazolium (chloride) (10 mg) CTC|Cyanotolyl Tetrazolium Chloride; 5-cyano-2,3-bis(4-methylphenyl)-2H-tetrazolium, monochloride
二水鉬酸鈉(1KG) Sodium Molybdate(VI), Dihydrate, 10102-40-6; MW 241.95; ACS
Meloxicam (50 mg) 4-hydroxy-2-methyl-N-(5-methyl-2-thiazolyl)-1,1-dioxide-2H-1,2-benzothi-3-carboxamide; Coxicam|UH-AC 62XX; Meloxicam
DAN-1 EE (hydrochloride) (10 mg) 4-[[(3-amino-2-naphthalenyl)amino]methyl]-benzoic acid, ethyl ester, monohydrochloride; DAN-1 EE (hydrochloride)
4-(1,1,3,3-Tetramethylbutyl)phenyl-polyethylene glycol, t-Octylphenoxypolyethoxyethanol, Polyethylene glycol tert-octylphenyl etxen Triton X-100, MegaPure Detergent, 10% Solution
Xestospongin C (1 mg) [1R-(1R,4aR,11R,12aS,13S,16aS,23R,24aS)]-eicosahydro-5H,17H-1,23:11,13-diethano-2H,14H-[1,11]dioxacycloeicosino[2,3-b:12,13-b1]dipyridine; XeC|Araguspongine E; Xestospongin C
SureLight Allophycocyanin (APC) (1 mg) SureLight Allophycocyanin (APC)
DAPT (50 mg) N-[2S-(3,5-difluorophenyl)acetyl]-L-alanyl-2-phenyl-1,1-dimethylethyl ester-glycine; GSI-IX; DAPT
W-15 (10 mg) 4-chloro-N-[1-(2-phenylethyl)-2-piperidinylidene]-benzenesulfonamide
JWH 081 N-(4-hydroxypentyl) metabolite (10 mg) (1-(4-hydroxypentyl)-1H-indol-3-yl)(4-methoxynaphthalen-1-yl)methanone; JWH 081 N-(4-hydroxypentyl) metabolite
DiaEasy Dialyzer (3 ml) MWCO 6-8 kDa DiaEasy Dialyzer (3 ml) MWCO 6-8 kDa
ω-3 Arachidonic Acid-d8 (500 ug) 8Z,11Z,14Z,17Z-eicosatetraenoic-8,9,11,12,14,15,17,18-d8 acid; ω-3 AA-d8; ω-3 Arachidonic Acid-d8
4-Chlorometxcathinone (xy7nochloride) (10 mg) 4-CMC|Clephedrone; 1-
鬼筆環(huán)肽-iFluor 700偶聯(lián)物 Phalloidin-iFluor 700 Conjugate
phospho-Linoleoyl Ethanolamide (500 ug) N-[2-(phosphonooxy)etxyl]-9Z,12Z-octadecadienamide, diwo7ium salt; phospho-LEA; phospho-Linoleoyl Ethanolamide
Oleoyl Ethanolamide (5 mg) N-(2-xy7noxyetxyl)-9Z-octadecenamide; OEA|Oleic Acid Ethanolamide; Oleoyl Ethanolamide
(3R,5aS,6R,8aS,9R,12S,12aR)-Octaxy7no-3,6,9-trimetxyl-3,12-epoxy-12H-pyrano[4,3-j]-1,2-benzodioxepin-10(3H)-one Artemisinin
AgarmediumC
沙門氏菌顯色培養(yǎng)基A 1000 mL/瓶 incubation media 沙門氏菌顯色培養(yǎng)基A 1000 mL/瓶
牛津瓊脂基礎 100g 用于單核增生李斯特氏菌的選擇性分離(SN0184-2005)。
瓊脂培養(yǎng)基SAgarmediumS(R2A)用于飲用水中細菌總數(shù)的計數(shù)。
BBLAgarMedium
梭菌屬測定用培養(yǎng)基250g用于梭菌屬細菌檢測
甲苯胺藍-DNA酶瓊脂 Toluidine Blue DNAse Agar 用于核糖核酸酶檢測
C.L.E.D 培養(yǎng)基 C.L.E.D Medium 250 用于尿液中微生物的選擇性分離培養(yǎng)(OXOID方法)
梭菌*250g/瓶用于梭菌的增菌培養(yǎng)incubationmedia梭菌*250g/瓶用于梭菌的增菌培養(yǎng)
SimmonsCitrateAgar
雙脫氧 dNTP 套裝40uL×4圖片BufferedListeriaEnrichmentBrothSupplement
B5培養(yǎng)基 B5 Medium 用于植物組織培養(yǎng)
LIA瓊脂 Lysine Iron Agar 250克 食品中沙門氏菌生化試驗
選擇性APS肉湯基礎250g/瓶非動物源配方,用于分子生物學試驗中大腸桿菌的保存和培養(yǎng)incubationmedia選擇性APS肉湯基礎250g/瓶非動物源配方,用于分子生物學試驗中大腸桿菌的保存和培養(yǎng)
EnterococcusAgar
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