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更新時(shí)間:2017-07-17 13:55:26瀏覽次數(shù):105次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)高 GC 革氏陽(yáng)性細(xì)菌 PCR Mix 5100 次圖片
古細(xì)菌 + 真細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次保存
環(huán)狀 DNA 全基因組擴(kuò)增試劑盒30 次保存產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫(kù)選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,十分簡(jiǎn)單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊(cè)疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡(jiǎn)單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
環(huán)狀 DNA 全基因組擴(kuò)增試劑盒30 次保存變性溫度與時(shí)間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會(huì)產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會(huì)啟動(dòng)。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會(huì)很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會(huì)影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94℃ 20~30 秒,高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95℃。 退火溫度與時(shí)間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
環(huán)狀 DNA 全基因組擴(kuò)增試劑盒30 次保存DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯(cuò)配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C)%含量進(jìn)行推測(cè),一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃,退火時(shí)間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長(zhǎng)時(shí)間退火沒有必要。
環(huán)狀 DNA 全基因組擴(kuò)增試劑盒30 次保存詳細(xì)說明書:
環(huán)狀 DNA 全基因組擴(kuò)增試劑盒30 次保存使用方法:
1. 以 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
3-methoxy Prostaglandin F1α (1 mg) 3-methoxy-9。alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-prost-13Z-en-1-oic acid; 3-methoxy PGF1α; 3-methoxy Prostaglandin F1α
Clonidine (hydrochloride) (500 mg) Catapres|Kapvay|ST 155; N-(2,6-dichlorophenyl)-4,5-dihydro-1H-imidazol-2-amine, monohydrochloride
胰蛋白胨(500GM) Tryptone, Tryptic digest of casein.
Rabeprazole (sodium salt) (10 mg) 2-[[[4-(3-methoxypropoxy)-3-methyl-2-pyridinyl]methyl]sulfinyl]-1H-benzimidazole, monosodium salt; Aciphex
Hydroxy Linoleins (500 ug) Hydroxy Linoleins
YPAC Cocktail Set (1000X) StemBoost YPAC Cocktail Set (1000X), Sterile-Filtered
MPO Hydrogen Peroxide (1 ea) MPO Hydrogen Peroxide
*標(biāo)記單甲基化組蛋白H3K79多肽 Biotinylated Monomethyl Histone H3K79 Peptide (200 ul)
3-dodecanoyl-NBD Cholesterol (500 ug) 12-[(7-nitno-2,1,3-benzoxadiazol-4-yl)amino]-(3S,10R,13R)-3-methoxy-10,13-dimethyl-17-((R)-6-methylheptan-2-yl)-tetradecahydro-1H-cyclopenta[α]e; 3-C12-NBD Cholesterol; 3-dodecanoyl-NBD Cholesterol
Wiskostatin (1 mg) 3,6-dibromo-α-[(dimethylamino)methyl]-9H-carbazole-9-ethanol
AM694 N-pentanoic acid metabolite-d5 (500 ug) 5-(3-(2-iodobenzoyl)-1H-indol-1-yl-2,4,5,6,7-d5)pentanoic acid; AM694 N-pentanoic acid metabolite-d5
N,N -Dicyclohexylurea (100 g) DCU|NSC 1713, N,N -Dicyclohexylurea, N,N’-dicyclohexyl-urea
Precoated (Goat Anti-Mouse IgG) EIA 96-Well Strip Plate (5 ea) Precoated (Goat Anti-Mouse IgG) EIA 96-Well Strip Plate
Trimetxoprim (50 g) Trimpex; 5-[(3,4,5-trimetxoxypxenyl)metxyl]-2,4-pyrimidinediamine
FluoroQuest封篇及,含DAPI FluoroQuest Mounting Medium with DAPI
Donepezil (10 mg) 2,3-dixy7no-5,6-dimetxoxy-2[[1-(pxenylmetxyl)-4-piperidinyl]metxyl]-1H-inden-1-one; Aricept ; Donepezil
R-Palmitoyl-(1-metxyl) Ethanolamide (5 mg) N-(2-xy7noxy-1R-metxyletxyl)-hexadec*; R-1 PMA; R-Palmitoyl-(1-metxyl) Ethanolamide
N-[(1-metxyl-4-piperidinyl)metxyl]-3-[3-(trifluorometxoxy)pxenyl]imidazo[1,2-b]pyridazin-6-amine SGI-1776
肉湯培養(yǎng)基250g用于初次分離細(xì)菌的增菌培養(yǎng)
糖發(fā)酵基礎(chǔ)肉湯 Bromcresol Purple Broth Base 適用于微生物檢驗(yàn)中各種糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn),無菌加入各種糖醇類物質(zhì)(SN標(biāo)準(zhǔn))
SCHAEDLER厭氧菌瓊脂 SCHAEDLER Agar 250克 厭氧菌的分離培養(yǎng)
亞碲酸鉀血瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用于白喉?xiàng)U菌的分離培養(yǎng),需添加亞碲酸鉀及羊血incubationmedia亞碲酸鉀血瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用于白喉?xiàng)U菌的分離培養(yǎng),需添加亞碲酸鉀及羊血
EnterococcusBroth
AgarmediumH(MacConkeyagar)
Anaerobic agar acc.to BREWER 厭氧性瓊脂 1.05452.0500 MERCK默克 incubation media Anaerobic agar acc.to BREWER 厭氧性瓊脂 1.05452.0500 MERCK默克
EB增菌液凍干配套試劑 10支 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。
戊烷脒多粘菌素B瓊脂基礎(chǔ)PentaneAmidinespolymyxinBagarbase
APTBroth
環(huán)狀 DNA 全基因組擴(kuò)增試劑盒30 次保存瓊脂培養(yǎng)基H250g用于腸道致病菌的選擇性分離培養(yǎng)。
A-1 Broth A-1肉湯 1.00415.0500 MERCK默克 incubation media A-1 Broth A-1肉湯 1.00415.0500 MERCK默克
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 10支 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。
十二烷基鈉瓊脂Sodiumlaurylsulfateagar用于鼠疫桿菌抗噬菌體培養(yǎng)
APT肉湯 250g 用于異質(zhì)發(fā)酵乳酸桿菌和其它需高含量鹽酸胺素菌的培養(yǎng)。
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