通用型 RT-LAMP 試劑盒50 次圖片-上海莼試生物技術(shù)有限公司

通用型 RT-LAMP 試劑盒50 次圖片產(chǎn)品及特點(diǎn)：
易錯(cuò) PCR（error-prone PCR）是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性，在一定條件下（如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在）能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法，則可從構(gòu)建的突變庫(kù)選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下：本產(chǎn)品就是專門(mén)為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開(kāi)發(fā)，本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn)：
1. 即開(kāi)即用，十分簡(jiǎn)單方便，尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化，突變率穩(wěn)定，突變沒(méi)有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% （±0.13%），詳見(jiàn)使用手冊(cè)疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡(jiǎn)單，但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn)，則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體，也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCR（sequential error-prone PCR），只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可，使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物，對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物，建議分段擴(kuò)增。
通用型 RT-LAMP 試劑盒50 次圖片變性溫度與時(shí)間：
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度，達(dá)不到變性溫度就不會(huì)產(chǎn)生單鏈 DNA 模板，PCR 也就不會(huì)啟動(dòng)。變性溫度低則變性不*， DNA 雙鏈會(huì)很快復(fù)性，因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高，又會(huì)影響酶的活性。一般情況下可設(shè)為 94℃ 20~30 秒，高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短，以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力，高變性溫度不宜超過(guò) 95℃。退火溫度與時(shí)間：退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng)，但過(guò)高則引物不能與模板牢固結(jié)合.
通用型 RT-LAMP 試劑盒50 次圖片DNA 擴(kuò)增效率下降；
溫度低產(chǎn)量高，但過(guò)低可造成引物與模板錯(cuò)配，非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設(shè)置特定反應(yīng)的適退火溫度，可根據(jù)引物的（G+C）%含量進(jìn)行推測(cè)，一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引物的熔解溫度 Tm 低 5℃，退火時(shí)間一般為 30~60 秒，足以使引物與模板之間*結(jié) 合，長(zhǎng)時(shí)間退火沒(méi)有必要。
通用型 RT-LAMP 試劑盒50 次圖片使用方法：
1. 以 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例，如果反應(yīng)體系不是 30 uL，各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中，加入下列成分：易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板（10ng/uL） 1 uL PCR 引物(自備，10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶（5U/uL） 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR（循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見(jiàn)下表），然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒(méi)有優(yōu)化的 PCR 條件，一般可以先嘗試下面的 PCR 條件： PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘循環(huán) 30 次（見(jiàn)注） 72℃ 1 分鐘注：易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng)，也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
3-methoxy Prostaglandin F1α （5 mg） 3-methoxy-9。alpha。，11。alpha。，15S-trihydroxy-prost-13Z-en-1-oic acid； 3-methoxy PGF1α； 3-methoxy Prostaglandin F1α

Vitamin K3 （25 g） Menadione|NSC 4170； 2-methyl-1,4-nepxtxelenedione

鹽酸*（1GM） Vancomycin， HCl， 1404-93-9； MW 1485.71； ≥590ug/mg

Rabeprazole （sodium salt）（5 mg） 2-[[[4-（3-methoxypropoxy）-3-methyl-2-pyridinyl]methyl]sulfinyl]-1H-benzimidazole， monosodium salt； Aciphex

Hydroxy Linoleins （5 mg） Hydroxy Linoleins

（2S，3R）-3-（3，4-Difluorophenyl）-2-（4-fluorophenyl）-4-hydroxy-N-（（3S）-2-oxo-5-phenyl-2，3-1H-benzo[e][1，4]diazepin-3-yl）butyramide] Compound 34
β-Hydroxybutyrate Assay Buffer （1 ea） β-HB Assay Buffer； β-Hydroxybutyrate Assay Buffer

BIX 01294 三鹽酸鹽水合物 BIX 01294 trihydrochloride hydrate （1 mg）

3-hexanoyl-NBD Cholesterol （5 mg） 6-[（7-nitno-2，1，3-benzoxadial-4-yl）amino]-cholest-5-en-3-ol； 3-C6-NBD Cholesterol； 3-hexanoyl-NBD Cholesterol

ADB-PINACA N-（5-hydroxypentyl） metabolite （1 mg） N-（1-amino-3,3-dimethyl-1-oxobutan-2-yl）-1-（5-hydroxypentyl）-1H-indazole-3-carboxamide

N-（4-hydroxypentyl） metabolite-d5 （500 ug）（1-（4-hydroxypentyl）-1H-indol-3-yl）（2，2，3，3-tetramethylcyclopropyl）methanone-2，4，5，6，7-d5； N-（4-hydroxypentyl） metabolite-d5

Caylin-1 (50 mg) Caylin-1, 4-[4,5-bis(3,4-chlorophenyl)-2-(2-isopropoxy-4-methoxy-phenyl)-4,5-dihydro-imidazole-1-carboxyl]-piperazin-2-one
High-Binding 96-Well Solid Plate （5 ea） High-Binding 96-Well Solid Plate

Biochanin A （100 mg） 4’-metxyl Genistein|5,7-dixy7noxy-4’-metxoxyisoflavone|NSC 123538； 5,7-dixy7noxy-3-（4-metxoxypxenyl）-4H-1-benzopyran-4-one

新型鈣離子熒光探針Fluo-8，鈉鹽 Fluo-8， wo7ium salt

Olanzapine （100 mg） 2-metxyl-4-（4-metxyl-1-piperazinyl）-10H-thieno[2，3-b][1，5]benzodiazepine； Zyprexa ； Olanzapine

R-Palmitoyl-（1-metxyl） Ethanolamide （500 mg） N-（2-xy7noxy-1R-metxyletxyl）-hexadec*； R-1 PMA； R-Palmitoyl-（1-metxyl） Ethanolamide

（S）-3-（4-metxoxypxenyl）-N-（（S）-1-（（R）-2-metxyloxiran-2-yl）-1-oxo-3-pxenylpropan-2-yl）-2-（（S）-2-（2-morpholinoacetamido）propanamido）prop*； PR-957 ONX-0914
BacillusBacteriaMedium