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更新時間:2017-07-17 13:58:59瀏覽次數(shù):274次
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天凈沙 SPIA 擴(kuò)增試劑盒 ( 用于擴(kuò)增 DNA 模板 )20 次運(yùn)輸詳細(xì)說明書:
天凈沙 SPIA 擴(kuò)增試劑盒 ( 用于擴(kuò)增 DNA 模板 )20 次運(yùn)輸產(chǎn)品及特點:
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計位點,則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
天凈沙 SPIA 擴(kuò)增試劑盒 ( 用于擴(kuò)增 DNA 模板 )20 次運(yùn)輸變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94℃ 20~30 秒,高溫時間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95℃。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
天凈沙 SPIA 擴(kuò)增試劑盒 ( 用于擴(kuò)增 DNA 模板 )20 次運(yùn)輸DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C)%含量進(jìn)行推測,一般實驗中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時間退火沒有必要。
天凈沙 SPIA 擴(kuò)增試劑盒 ( 用于擴(kuò)增 DNA 模板 )20 次運(yùn)輸使用方法:
1. 以 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
Δ17-6-keto Prostaglandin F1α (100 ug) 6-oxo-9。alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-prosta-13E,17Z-dien-1-oic acid; ω-3 6-keto PGF2α; Δ17-6-keto Prostaglandin F1α
Amodiainonee (5 mg) Camoinonee|Flavoinonee|NSC 13453|SN 10751; 4-[(7-chloro-4-inoneolinyl)amino]-2-[(diethylamino)methyl]-phenol
酵母提取物(100GM) Yeast Extract, 8013-01-2
FUB-PB-22 (1 mg) inoneolin-8-yl-1-(4-fluorobenzyl)-1H-indole-3-carboxylate; FUB-PB-22
Linolein Hydroperoxides (50 mg) Linolein Hydroperoxides
3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine; TMBHK TMB, High Kinetics
DPP (IV) (human recombinant) Assay Reagent (1 ea) DPP IV (human recombinant); DPP (IV) (human recombinant) Assay Reagent
5-典-6-安基-1,2-本并酮 Discontinued PARP Inhibitor II, INH2BP (5 mg)
2-Acetyl-5-tetrahydroxybutyl Imidazole (500 ug) 1-[5-[(1R,2S,3R)-1,2,3,4-tetrahydroxybutyl]-1H-imidazol-2-yl]-ethanone; 2-ATHBI|THI|2-Acetyl-4-tetrahydroxybutyl Imidazole; 2-Acetyl-5-tetrahydroxybutyl Imidazole
ADBICA N-(5-hydroxypentyl) metabolite (5 mg) N-(1-amino-3,3-dimethyl-1-oxobutan-2-yl)-1-(5-hydroxypentyl)-1H-indole-3-carboxamide
N-pentanoic acid metabolite-d5 (5 mg) 5-(3-(2,2,3,3-tetramethyl-cyclopropanecarbonyl)-1H-indol-1-yl)pentanoic acid-2,4,5,6,7-d5; XLR11 N-pentanoic acid metabolite-d5; N-pentanoic acid metabolite-d5
N-Stearoyl Taurine (50 mg) N-Stearoyl Taurine, 2-[(1-oxooctadecyl)amino]-ethanesulfonic acid
96-Well Solid Plate (white) (1 ea) 96-Well Solid Plate (white)
L-( 6-deoxy-L-Galactose; 6-deoxy-L-galactose
鈣離子指示探針Cal-520FF, AM Cal-520FF, AM
Lutein (5 mg) E 161b|FloraGLO|Xanthophyll; (6’R)-β,ε-carotene-3R,3’R-diol
Phytanic Acid (10 mg) 3,7,11,15-tetrametxylhexadecanoic acid; Phytanic Acid
trans-4-[[(5S)-5-[[[3,5-bis(trifluorometxyl)pxenyl]metxyl](2-metxyl-2H-tetrazol-5-yl)amino]-2,3,4,5-tetraxy7no-7,9-dimetxyl-1H-1-benzazepin-1-yl]metxyl]- cyclohexanecarboxylic acid; LY2484595 Evacetrapib
*卵黃多粘菌素瓊脂平板(MYP)2838mX20個用于蠟樣芽孢桿菌的菌數(shù)測定及分離培養(yǎng)(GB/T4789.28-2003中4.64,GB/T4789.03,SN02和...
*葡萄糖酵母提取物選擇性培養(yǎng)基(OGYE培養(yǎng)基) (CM0545) Oxoid incubation media *葡萄糖酵母提取物選擇性培養(yǎng)基(OGYE培養(yǎng)基) (CM0545) Oxoid
炭黑曲霉 分離源:發(fā)酵劑 支/瓶
心浸液瓊脂250g用于培養(yǎng)營養(yǎng)要求高的微生物
克氏雙糖鐵瓊脂 250g 用于細(xì)菌復(fù)合生化試驗(葡
RoseBengalAgarMedium
嗜鹽菌選擇性瓊脂 250(g) incubation media 嗜鹽菌選擇性瓊脂 250(g)
液體乳糖培養(yǎng)基 Lactose Medium 250克 用于食品中沙門氏菌檢驗前增菌培養(yǎng)
細(xì)菌L型增菌液65用于L型細(xì)菌增菌培養(yǎng)incubationmedia細(xì)菌L型增菌液65用于L型細(xì)菌增菌培養(yǎng)
Xylose-gelatinmedium
天凈沙 SPIA 擴(kuò)增試劑盒 ( 用于擴(kuò)增 DNA 模板 )20 次運(yùn)輸三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基(TSI)藥典2208g用于鑒別腸道菌發(fā)酵蔗糖、乳糖、葡萄糖及產(chǎn)生硫化氫的生化反應(yīng)(《中華人民共和國藥典》20..
7311-prf OEpiCM-prf 卵巢上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml incubation media 7311-prf OEpiCM-prf 卵巢上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基 300ml/袋*10 用于大腸菌群,糞大腸菌群,大腸桿菌的測定(GB標(biāo)準(zhǔn))
SodiumluriteBrothBase
STAAMedium
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