當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>RNA/DNA提取>>克隆及表達(dá)產(chǎn)品>> DNA 快速連接試劑盒30 次使用說明書
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更新時間:2017-07-18 13:13:20瀏覽次數(shù):220次
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DNA 快速連接試劑盒30 次使用說明書產(chǎn)品及特點(diǎn):
本產(chǎn)品是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細(xì)胞,適用于昆蟲桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株,用于產(chǎn)生重組 Bacmid。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測,本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107CFU/μg。 DH10Bac 細(xì)胞包含親本 Bacmid bMON14272 和輔助質(zhì)粒 pMON7124。親本 Bacmid 包含一個 mini-F 復(fù)制子、*抗性基因、att Tn7 位點(diǎn)和 lac Zα-互補(bǔ)因子。輔助質(zhì)粒包含 tns ABCD 區(qū)域,該區(qū)域提供了 mini-Tn7 從供體質(zhì)粒插入親本 Bacmid 靶位點(diǎn)所需要的轉(zhuǎn)座蛋白。供體如 pFastBac 系列質(zhì)粒(pFastBac1,pFastBacDual 等)含有 Tn7R 和 Tn7L 同源重組臂,Tn7R 和 Tn7L 之間包含*抗性基因、昆蟲病毒多角體基因啟動子、多克隆位點(diǎn)和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信號。當(dāng)含有靶基因 pFastBac 的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到 DH10Bac 細(xì)胞后,發(fā)生重組后就可產(chǎn)生重組 Bacmid,提取純化重組 Bacmid 轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞 Sf9 或 Sf21 就可以包裝產(chǎn)生昆蟲病毒。此外,DH10Bac 細(xì)胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的產(chǎn)物可以實(shí)現(xiàn)β-半乳糖苷酶的α-互補(bǔ)現(xiàn)象,用于重組 bacmid 的藍(lán)白斑篩選。
DNA 快速連接試劑盒30 次使用說明書規(guī)格及成分:
DNA 快速連接試劑盒30 次使用說明書使用方法:
1. 制備含有如下抗生素的 LB 固體平板:50 μ g/mL Kanamycin,7 μ g/mL gentamicin,10 μg/mL tetracycline,100 μg/mL X-gal,40 μg/mL IPTG。
2. 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為 50-100 μL,可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞為例。
3. 待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入 1-10 ng 重組質(zhì)粒,用移液器輕輕吹打混勻,冰浴 30 分鐘。
4. 42℃熱擊 90 秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置 2-3 分鐘。
5. 每個離心管中加入 900 μL 無菌的 SOC(不含抗生素),混勻后置于 37℃ 搖床, 200rpm 振蕩培養(yǎng) 4 小時。
6. 用 SOC 培養(yǎng)基進(jìn)行 10 倍梯度稀釋,如分成 3 個稀釋梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 取 100 μL 的各個梯度的培養(yǎng)物用于涂布。等平板中的液體*吸收后,倒置平板, 37℃培養(yǎng) 24-48 小時。 8. 保留剩余的菌液保存于 4℃,視平板上菌落生長情況決定去留。
IL11RA重組狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
Neuroprotective peptide/Gly-HN(Nuclear-encoded Humanin [HN(N 0.5mgNeuroprotective peptide/Gly-HN(Nuclear-encoded Humanin [HN(N)] Gly14) 神經(jīng)保護(hù)肽
TREML1重組人 TREML1 / TLT-1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
KIR2DL4 Protein Human 重組人 KIR2DL4 / CD158D 蛋白
IL23 Protein Mouse 重組小鼠 IL-23 (IL23A & IL12B Heterodimer) 蛋白
HA Protein H4N6 重組甲型流感 H4N6 (A/Swine/Ontario/01911-1/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
髓鞘少突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白(MOG)重組蛋白 Recombinant Myelin Oligodendrocyte Glycoprotein (MOG)
IL6重組人 IL6 / Interleukin-6 蛋白 Protein
PDCD1LG2重組人 B7-DC / PD-L2 / CD273 / PDCD1LG2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
CD4 Protein Human 重組人 CD4 / LEU3 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
Neuroprotective peptide/Gly-HN(Nuclear-encoded Humanin [HN(N 0.5mgNeuroprotective peptide/Gly-HN(Nuclear-encoded Humanin [HN(N)] Gly14) 神經(jīng)保護(hù)肽
KIR2DL4 Protein Human 重組人 KIR2DL4 / CD158D 蛋白
IL11RA重組狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
IL23 Protein Mouse 重組小鼠 IL-23 (IL23A & IL12B Heterodimer) 蛋白
TREML1重組人 TREML1 / TLT-1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
小鼠多聚免疫球蛋白受體(PIGR)ELISA試劑盒 ,英文名: PIGR ELISA Kit
人心型脂肪酸結(jié)合蛋白(h-FABP)ELISA檢測試劑盒Humanheartfattyacidbindingprotein,h-FABPELISAKit 96T/48T
大鼠前列腺素D合成酶(PGDS)免疫試劑盒 Rat Prostaglandin D Synthase,PGDS ELISA Kit
英文名稱RatantinuclearantibodyELISAKIT大鼠抗核抗體(ANA)規(guī)格:96T/48T
酵母/真菌D-葡萄糖含量氧化法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitVB6人維生素B6規(guī)格:48T/96T
小鼠白介素1受體拮抗劑(IL-1Ra)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human sialic acid (SA) ELISA Kit 人唾液酸(SA)ELISA試劑盒
HumanintactParathormone,i-PTHELISAKit 人全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humancardiacankyrinrepeatdomain1,ANKRD1ELISA試劑盒人心肌錨蛋白重復(fù)域1(ANKRD1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
重組腺病毒載體轉(zhuǎn)染試劑盒10次
HumanSolubleClusterofdifferentiation38,sCD38ELISAKit人可溶性CD38(sCD38)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
DNA 快速連接試劑盒30 次使用說明書人烏頭酸酶2(ACO-2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胃粘液素(GM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胃抑素(GIP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胃泌素細(xì)胞抗體(GCA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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