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更新時(shí)間:2017-07-18 13:15:55瀏覽次數(shù):164次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)一站式平末端克隆試劑盒20 次使用說明書規(guī)格及成分:
一站式平末端克隆試劑盒20 次使用說明書產(chǎn)品及特點(diǎn):
本產(chǎn)品是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細(xì)胞,適用于昆蟲桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株,用于產(chǎn)生重組 Bacmid。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測,本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107CFU/μg。 DH10Bac 細(xì)胞包含親本 Bacmid bMON14272 和輔助質(zhì)粒 pMON7124。親本 Bacmid 包含一個(gè) mini-F 復(fù)制子、*抗性基因、att Tn7 位點(diǎn)和 lac Zα-互補(bǔ)因子。輔助質(zhì)粒包含 tns ABCD 區(qū)域,該區(qū)域提供了 mini-Tn7 從供體質(zhì)粒插入親本 Bacmid 靶位點(diǎn)所需要的轉(zhuǎn)座蛋白。供體如 pFastBac 系列質(zhì)粒(pFastBac1,pFastBacDual 等)含有 Tn7R 和 Tn7L 同源重組臂,Tn7R 和 Tn7L 之間包含*抗性基因、昆蟲病毒多角體基因啟動(dòng)子、多克隆位點(diǎn)和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信號(hào)。當(dāng)含有靶基因 pFastBac 的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到 DH10Bac 細(xì)胞后,發(fā)生重組后就可產(chǎn)生重組 Bacmid,提取純化重組 Bacmid 轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞 Sf9 或 Sf21 就可以包裝產(chǎn)生昆蟲病毒。此外,DH10Bac 細(xì)胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的產(chǎn)物可以實(shí)現(xiàn)β-半乳糖苷酶的α-互補(bǔ)現(xiàn)象,用于重組 bacmid 的藍(lán)白斑篩選。
一站式平末端克隆試劑盒20 次使用說明書詳細(xì)說明書:
一站式平末端克隆試劑盒20 次使用說明書使用方法:
1. 制備含有如下抗生素的 LB 固體平板:50 μ g/mL Kanamycin,7 μ g/mL gentamicin,10 μg/mL tetracycline,100 μg/mL X-gal,40 μg/mL IPTG。
2. 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為 50-100 μL,可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞為例。
3. 待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入 1-10 ng 重組質(zhì)粒,用移液器輕輕吹打混勻,冰浴 30 分鐘。
4. 42℃熱擊 90 秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置 2-3 分鐘。
5. 每個(gè)離心管中加入 900 μL 無菌的 SOC(不含抗生素),混勻后置于 37℃ 搖床, 200rpm 振蕩培養(yǎng) 4 小時(shí)。
6. 用 SOC 培養(yǎng)基進(jìn)行 10 倍梯度稀釋,如分成 3 個(gè)稀釋梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 取 100 μL 的各個(gè)梯度的培養(yǎng)物用于涂布。等平板中的液體*吸收后,倒置平板, 37℃培養(yǎng) 24-48 小時(shí)。 8. 保留剩余的菌液保存于 4℃,視平板上菌落生長情況決定去留。
IL1B重組小鼠 IL-1 beta / IL1B 蛋白 Protein
AACT protein(Alpha chymotrypsin protein 5mgAACT protein(Alpha chymotrypsin protein) 胰*
PDE3A重組人 PDE3A 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
KIT Protein Human 重組人 c-KIT / CD117 蛋白 (His 標(biāo)簽)
EFNA1 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H4N4 重組甲型流感 H4N4 (A/mallard duck/Alberta/299/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
前列腺酸性磷酸酶(ACP3)重組蛋白 Recombinant Acid Phosphatase 3, Prostatic (ACP3)
CST6重組人 Cystatin E / CST6 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
PFDN5重組人 PFDN5 / MM-1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
S100A12 Protein Human 重組人 S100A12 / CAGC / Calgranulin-C 蛋白
蛋白激酶Cγ(PKCγ)重組蛋白 Recombinant Protein Kinase C Gamma (PKCg)
KIT Protein Human 重組人 c-KIT / CD117 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CDCP1重組小鼠 CDCP1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
TNFRSF11B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Osteoprotegerin / TNFRSF11B 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
CYGB重組人 Cytoglobin / CYGB 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人心肌營養(yǎng)素1(CT-1)免疫試劑盒 Human cardiotrophln 1 ELISA Kit
蔗糖磷酸化酶(SP)測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣
Ratmatrixmetalloproteinase1,MMP-1ELISA試劑盒大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanhemagglutinin,HAELISA試劑盒人血凝素(HA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanLipoarabinomannan,LAMELISAKit人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素1α(IL-1α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human advanced glycation end products (AGEs) ELISA Kit 人晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒
HumansubstancePreceptor,SP-RELISAKit 人P物質(zhì)受體(SP-R)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humancardiotrophln1,CT-1ELISA試劑盒人心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品NOS基因檢測試劑盒20次
Humansolubleadhesionmolecules,SamELISAKit人可溶性粘附分子(Sam)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
一站式平末端克隆試劑盒20 次使用說明書人維生素D2(VD2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人維生素D(VD)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人維生素C(VC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人維生素B6(VB6)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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