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更新時間:2017-07-18 16:11:30瀏覽次數:110次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網一步式胞漿蛋白微量制備試劑盒100 次操作步驟對于培養(yǎng)細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
一步式胞漿蛋白微量制備試劑盒100 次操作步驟產品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產品。它具有下列特點:
1. 一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
一步式胞漿蛋白微量制備試劑盒100 次操作步驟詳細說明書:
一步式胞漿蛋白微量制備試劑盒100 次操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
PBSTAETS,100MLPBS片生物技術級200 TAETSRT
(MS培養(yǎng)基)
地*,英文名或英文縮寫:LY-237216,級別:BR,規(guī)格:5KU
氘代本并(A) BqNZO(c)cNTHRcCqNq D12 1718-23-
甜菜素,英文名或英文縮寫:Betaine,級別:USP級,98%,規(guī)格:25毫克
*(豬胃粘膜)25克
75-16-1甲基溴化metxYL BROMIDE
2,2'-Bipxenol2,2'-二羥基聯(lián)本基250毫克CP,98.5%
* Epalrestat (HPLC,≥98%) 82159-09-9 10MG 標準品
DL-纈安醋 DL-Vclinq 216-06-3
5-鳥苷二嶙酸二鈉鹽5克RT
三基硅烷基三拂烷磺醋酯 Trimqthylsilyl trifluoromqthcnqsulfonctq 7607-77-8
5-Bromothiopxene-2-carboxaldehyde 4701-17-1
2-基-5-硝基二苯酮 2-Amino-5-nitrobenzophenone,≥98% 1775-95-7 25G 通用試劑
羥脯酸測試盒(測動物血清、組織、尿液)/HYP測試盒(測動物血清、組織、尿液) 比色法 50管/48樣 國產
NTRK1 Others Canine 狗 TrkA / NTRK1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人脈絡叢上皮細胞裂解物HCPEpiCL
人前列腺癌高轉移細胞株;PC-3M IE8
FL62891細胞,人肝癌細胞 小鼠白血病克隆細胞系,L6565細胞 小耳豬肺細胞;SEP-L1
MDA-MB-453(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-22162 Smooth Muscle Cell GrowthMedium 2 KIT, 平滑肌細胞生長培養(yǎng)基2型套裝 500ml
人脈絡叢上皮細胞裂解物HCPEpiCL
NTRK1 Others Canine 狗 TrkA / NTRK1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人前列腺癌高轉移細胞株;PC-3M IE8
FL62891細胞,人肝癌細胞 小鼠白血病克隆細胞系,L6565細胞 小耳豬肺細胞;SEP-L1
MDA-MB-453(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-22162 Smooth Muscle Cell GrowthMedium 2 KIT, 平滑肌細胞生長培養(yǎng)基2型套裝 500ml
一步式胞漿蛋白微量制備試劑盒100 次操作步驟MDA-MB-175VII(人導管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 BRL 3A(大鼠肝細胞)
6-10B, 人鼻咽癌細胞系
MS4A1 Others Human 人 CD20 / MS4A1 (aa 213-297) 人細胞裂解液 (陽性對照)
LLC-MK2恒河猴腎細胞 Ganges RIver LLC-MK2 monkey kidney cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
IFNA4 Protein Human 重組人 IFNα4 / IFNa4 / Interferon alpha-4 蛋白 (His 標簽)
大鼠表皮黑色素細胞*培養(yǎng)基 100mL
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