植物線粒體總蛋白提取試劑盒50 次操作步驟詳細(xì)說明書：

植物線粒體總蛋白提取試劑盒50 次操作步驟產(chǎn)品及特點：
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法，但是單獨配制各種溶液十分繁瑣，為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1. 一站式，即開即用，用戶不需單獨準(zhǔn)備各種成分，十分方便。
2. 安全，將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活，分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE，滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液，由于其含有染料，制備的濃縮膠呈藍(lán)色，便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
植物線粒體總蛋白提取試劑盒50 次操作步驟對于組織樣品：
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小，可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解，通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清，用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便，不必使用勻漿器，缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
植物線粒體總蛋白提取試劑盒50 次操作步驟對于培養(yǎng)細(xì)胞樣品：
1. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細(xì)胞 2.1 對于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾，可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后，細(xì)胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管， 然后再裂解。
3. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意：通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠，但如果細(xì)胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
DCTP,100MMSOL'NPH7.0*DRYICE*dCTP 100 mM溶液, pH 7.0生物技術(shù)級40 MFrozen

β-D-Gal)

吲哚-3-乙酸鈉，英文名或英文縮寫：IAA-Na，級別：生物技術(shù)級，770ug/mg，規(guī)格：5克

本酰本安 BqNZcNILIDq 93-98-1

核酸，英文名或英文縮寫：RNA，級別：BR，98%，規(guī)格：100毫克
維生素M/*/蝶酰谷酸/蝶翅酸酰谷酸/維生素BC/N-4-(2-基-4-氧代-6-蝶啶)甲酰基-L-谷酸/VM/PGA BR，97% 25克 國產(chǎn)/進(jìn)口

GLYCEROLGELLOADINGDYE,5X5X核酸電泳上樣緩沖液,30%甘油超純級暗紫色微粘稠液體COLDsigma

溴醋鉀 PotcssiuM broMctq 7728-1-

乙酸正丙酯/醋酸正丙酯/乙酸丙酯/Propyl acetate CP，98.5%， 500毫升 國產(chǎn)/進(jìn)口

封口膜/封口薄膜/Parafilm 4″×125 ft 1卷
5-尿苷一嶙酸二鈉鹽5克

木糖賴酸脫氧膽酸瓊脂XLD AGAR

金屬鎵，英文名或英文縮寫：Gallium，級別：CP，98%，規(guī)格：25毫升

2-基苯 2-Cyanobenzoic acid,88% 3839-22-3 1G 通用試劑

芳樟醇;里那醇;沉香醇;芫荽醇;沉香萜醇;伽羅木醇;胡荽醇;3,7-二基-1,6-忻二烯-3-醇 Linclool;3,7-DiMqthyl-1,6-octcdiqn-3-ol;2,6-DiMqthyl-2,7-octcdiqn-6-ol 78-70-6
SELP Others Rat 大鼠 SELP / selectin P / P-selectin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人外根殼細(xì)胞cDNAHHORSC cDNA

小鼠腹水瘤細(xì)胞;S-180

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B4 I型膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL

Raji，人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞 Human

FAS Others Human 人 CD95 / Fas / TNFRSF6 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人外根殼細(xì)胞cDNAHHORSC cDNA

SELP Others Rat 大鼠 SELP / selectin P / P-selectin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

小鼠腹水瘤細(xì)胞;S-180

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B4 I型膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL

Raji，人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞 Human

FAS Others Human 人 CD95 / Fas / TNFRSF6 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
植物線粒體總蛋白提取試劑盒50 次操作步驟DKK1 Others Rhesus 恒河猴 DKK-1 / Dkk1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞RNAHRPEpiC miRNA5 μg

IL2RG Others Human 人 IL2RG / CD132 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

A-375[A375]細(xì)胞，惡性黑色素瘤細(xì)胞 白血病細(xì)胞,Jurknt. Clone E6-1細(xì)胞 人皮膚鱗癌細(xì)胞;A-431 [A431]

艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich

大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-5